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- 保存条件:
避免反复冻融。2-8°C不超过一个月,-80°C不超过327个月
- 规格:
50ug/100ug
- 物种Homo sapiens (Human,人) 相同的名称,不同的物种。
- 来源原核表达
- 宿主E.coli
- 内毒素水平<1.0EU/µg(LAL法测定)
- 亚细胞定位n/a
- 预测分子量30.9kDa
- 实际分子量31kDa(差异分析请参阅说明书)
- 片段与标签Asp216~Asn457 with N-terminal His Tag
- 缓冲液成份100mM NaHCO3, 500mM NaCl缓冲液(pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
- 性状冻干粉
- 纯度> 95%
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文献和实验,PD-1/PD-L1这么值钱,大家一定好奇它到底是什么鬼。 PD-1全名是程序性死亡分子1(programmed death-1)是Ishida等[1]通过消减杂交技术于1992年发现的[2],是CD28家族成员,胞质区含有2个酪氨酸残基,1个位于靠近N端的免疫受体酪氨酸抑制基序(ITIM)中,另一个1个位于靠近C端的免疫受体酪氨酸转化基序(ITSM)中[2]。 PD-L1(CD274)是B7家族成员,是PD-1的配体,属于1型跨膜蛋白,全长290个氨基酸,包含1个IgV样
组分,也是一个关键的毒性因子,且与细菌生物膜合成、真核细胞感染、抗生素抗性和免疫调节息息相关。因此可作为一个潜在的药物靶点。 以下是从大肠杆菌中纯化非标签膜蛋白 0mpA 亚单位的流程。 图 2. 大肠杆菌中纯化非标签膜蛋白 0mpA 亚单位流程图 首先使用合适的去垢剂 C8E4,把 OmpA 膜蛋白溶解出来; 然后使用阴离子交换层析柱 RESOURCE Q 1 mL进行初步纯化,收集目标蛋白洗脱液; 浓缩后上样进行最后一步分子筛精纯,使用高分辨率层析柱 Superdex 200
的念念不忘,随着冷冻电镜技术的发展,会有更多的膜蛋白结构得到解析,助力后续的功能研究和药物发现。 有了冷冻电镜这把利器之后,真正制约膜蛋白研究的其实是样品的制备。 常规的膜蛋白制备流程如下: 特点是: 蛋白含量低 收率低 活性易降低 纯化过程需要优化 去垢剂 天然表达的膜蛋白含量极低,很难纯化。就算是重组表达体系,生产出的膜蛋白通常具有细胞毒性,因此表达量也远低于常规重组蛋白。在整个纯化过程中都需要选择合适的去垢剂才能使膜蛋白
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