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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
38
- 英文名:
次高分子量蛋白质Marker
- CAS号:
详见说明书
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海谷研
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
10T
| 产品名称 | 次高分子量蛋白质Marker价格 |
| 规格 | 10T |
| 单位 | 支 |
1. 贴壁细胞的消化:
a) 吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
b) 加入少量胰蛋白酶消化液,盖过细胞即可,室温放置1-2分钟。不同的细胞消化时间有所不同,对于贴壁牢固的细胞可适当延长消化时间。
c) 显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除消化液。加入含血清的细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
d) 如果发现消化不足,可加入胰蛋白酶消化液重新消化。
e) 如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2. 组织的消化:
不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
实验室常见故障的处理方法:
1. 螺旋瓶盖太过紧固不易打开:
当螺旋瓶盖拧不开时,可用电吹风或小火焰烘烤瓶盖周围,使其受热膨胀,再用于布包住瓶盖用力将其旋开。
2. 清除仪器上的特殊污垢:
在回流操作或浓缩溶液时,经常会有结晶析出在液面上方的烧瓶内壁上,且附着牢固,不仅不能继续参加反应,有时还会因热稳定性差而逐渐分解变色。
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次高分子量蛋白质Marker价格操作步骤:
1、 按实验具体要求操作或参考下列革兰氏染色的方法。
2、 涂片:取待检细菌,于载玻片中央涂成薄层或者在载玻片上滴加少许无菌水,取菌与水混合均 匀,涂成薄层。
3、 干燥:涂片后在室温下自然干燥,也可在酒精灯上略加温,使之迅速干燥。
4、 固定:手持载玻片一端,标本面朝上,在酒精灯的火焰外侧快速来回移动。
5、 初染:滴加结晶紫染色液染色,清水冲洗去染色液。
6、 媒染:滴加Gram碘液,并覆盖载玻片室温放置,水洗。
7、脱色:滴加脱色液摇动,直至流下的脱色液不出现紫色为止,立即用水冲去脱色液,终止反应。
8、 复染:滴加沙黄染色液染色,水洗。
9、 干燥。镜检:置油镜观察。 染色结果: 革兰氏阳性菌:蓝色至紫色;革兰氏阴性菌:红色。
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文献和实验相关专题 蛋白Marker可分为:一、未预染的Marker即宽分子 量蛋白标准、高分子量蛋白标准以及低分子量蛋白标准;二、预染的Marker即单色预染和多色预染。 在western blot 过程中,分子量Marker就像个螺丝钉一样没虽然是个小细节,然而就是这样一个小细节对实验结果有着不可忽视的作用。这个 Western Blot参照家族的一员的作用主要是用来指示蛋白条带所对应的分子量大小,只有标准量
在得不到足够信息的情况下,往往比较难以分析,大家多是在假定一些信息来回答问题,这样有时候碰巧符合了,但也有推断错误的时候。这样对解决问题是不利的。 如果不涉及到技术保密问题,关于蛋白质纯化问题都建议按下列信息来提问。 1、建议贴张SDS-PAGE图来分析一下,最好包括: Marker,胶浓度,变性还是非变性 诱导前 诱导后 破菌上清 破菌沉淀 沉淀洗涤上清 变性溶解上清 变性溶解沉淀 柱纯化前 柱纯化穿透 柱洗脱 等各个样品。 标上marker大小,电泳
温度下再反应10 个循环并重新分析;在恒定的退火温度下对起始DT PCR 产物的10 倍稀释物(1 :10~1 :1000) 重新作30 个循环的扩增;使用更多的模板量,并在原始PCR 混合物中掺入一定稀释度的阳性模板检测其中是否存在抑制物;改变缓冲液各成分的浓度(pH、Taq 聚合酶、dNTP、引物) ; 在PCR 混合物中加入增强剂;用嵌套式引物重新扩增第1 次PCR 产物的稀释物(1 :10~1 :1000) ;放弃此套引物,重新设计引物扩增。 如果观察到许多产物带或高分子量成片产物,可采取以下
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