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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
36
- 英文名:
超低分子量蛋白质Marker
- CAS号:
详见说明书
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海谷研
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
15T
超低分子量蛋白质Marker规格价格优惠,品质保证,库存现货,无效果,免费退款。公司现货销售,量大折扣,欢迎来电咨询。详细信息如下
| 产品名称 | 超低分子量蛋白质Marker规格 |
| 规格 | 15T |
| 单位 | 支 |
1、 按实验具体要求操作或参考下列革兰氏染色的方法。
2、 涂片:取待检细菌,于载玻片中央涂成薄层或者在载玻片上滴加少许无菌水,取菌与水混合均 匀,涂成薄层。
3、 干燥:涂片后在室温下自然干燥,也可在酒精灯上略加温,使之迅速干燥。
4、 固定:手持载玻片一端,标本面朝上,在酒精灯的火焰外侧快速来回移动。
5、 初染:滴加结晶紫染色液染色,清水冲洗去染色液。
6、 媒染:滴加Gram碘液,并覆盖载玻片室温放置,水洗。
7、脱色:滴加脱色液摇动,直至流下的脱色液不出现紫色为止,立即用水冲去脱色液,终止反应。
8、 复染:滴加沙黄染色液染色,水洗。
9、 干燥。镜检:置油镜观察。 染色结果: 革兰氏阳性菌:蓝色至紫色;革兰氏阴性菌:红色。
超低分子量蛋白质Marker规格使用方法:
1. 贴壁细胞的消化:
a) 吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
b) 加入少量胰蛋白酶消化液,盖过细胞即可,室温放置1-2分钟。不同的细胞消化时间有所不同,对于贴壁牢固的细胞可适当延长消化时间。
c) 显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除消化液。加入含血清的细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
d) 如果发现消化不足,可加入胰蛋白酶消化液重新消化。
e) 如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2. 组织的消化:
不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
实验室常见故障的处理方法:
1. 螺旋瓶盖太过紧固不易打开:
当螺旋瓶盖拧不开时,可用电吹风或小火焰烘烤瓶盖周围,使其受热膨胀,再用于布包住瓶盖用力将其旋开。
2. 清除仪器上的特殊污垢:
在回流操作或浓缩溶液时,经常会有结晶析出在液面上方的烧瓶内壁上,且附着牢固,不仅不能继续参加反应,有时还会因热稳定性差而逐渐分解变色。
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N-基-3-基苄 19499-61-7 试剂盒 组装/原装
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文献和实验减小,膜对低分子量蛋白的结合就越牢固。 通常用 0.45μ m 和 0.2μm 两种规格的 NC 膜。 大于20kD 的蛋白可用 0.45μm 的膜, 小于 20kD的蛋白就要用 0.2μ m 的膜了, 如用0.45μ m 的膜就会发生“Blowthrough”的现象。PVDF 膜灵敏度、分辨率和蛋白亲和力比常规的膜要高,非常适合于低 分子量蛋白的检测。但 PVDF 膜在使用之前必需用纯甲醇浸泡饱和 1-5 秒钟。 蛋白质常用的转移方法主要有两种:槽式湿转和半干转移。前者操作容易
、被转移生物大分子的特性以及分子大小等等因素,我们要量体裁衣,从杂交膜的材质、孔径和规格上都要做出合理的选择。 硝酸纤维素膜:硝酸纤维素膜是蛋白印迹实验的标准固相支持物。在低离子转移缓冲液的环境下,大多数带负电荷的蛋白质会与硝酸纤维素膜发生疏水作用而高亲和力的结合在一起,虽然这其中的机制还不是十分清楚,但由于硝酸纤维素膜的这个特性,而且易于封闭非特异性结合,从而得到了广泛的应用。在非离子型的去污剂作用下,结合的蛋白还可以被洗脱下来。根据被转移的蛋白分子量大小,要选择不同孔径的硝酸
不同孔径的NC膜。因为随着膜孔径的不断减小,膜对低分子量蛋白的结合就越牢固。通常用0.45µm和0.2µm两种规格的NC膜。大于20kD的蛋白可用0.45µm的膜,小于20kD的蛋白就要用0.2µm的膜了,如用0.45µm的膜就会发生“Blowthrough”的现象。PVDF膜灵敏度、分辨率和蛋白亲和力比常规的膜要高,非常适合于低分子量蛋白的检测。但PVDF膜在使用之前必需用纯甲醇浸泡饱和1-5秒钟。 蛋白质常用的转移方法主要有两种:槽式湿转和半干转移。前者操作容易,转移效率高;而后者适用
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