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- 百奥莱博
- JN0184-ZMA
- 北京
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
470
- 保质期：
6个月
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
100T
特别提示：包括荧光素酶检测试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：荧光素酶检测试剂盒
产品货号：JN0184
产品规格：100T
本试剂盒用于以虫荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶活性。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，发出生物荧光。然后通过荧光测定仪也称化学发光仪测定luciferin氧化过程中释放的生物荧光。通过荧光素和荧光素酶这一生物发光体系，可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。通常把目的基因转录的调控元件克隆在luciferase的上游或其他适当的地方，构建成报告基因质粒。转染细胞并适当刺激或处理后裂解细胞，测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断刺激前后或不同刺激对感兴趣的调控元件的影响。
试剂盒组成：
| 组份 | 规格（100次） | 保存 |
| 报告基因细胞裂解液 | 60ml | 4℃ |
| 荧光素酶检测试剂 | 10ml | 4℃ |
产品特点：
1、报告基因在翻译完成即有活性，不需要翻译后修饰，或荧光蛋白的成熟过程；
2、在所有化学荧光系统中具有zuì高的灵敏度，宿主细胞中无背景荧光；
3、检测时间快，一般单个样品检测只需要几秒钟。
产品用途：细胞生物学中用于基因表达研究或与基因表达偶联的其他细胞事件，如：报告基因活性检测、信号传导、mRNA加工、蛋白质折叠、蛋白质相互作用等。
应用实例：
图例一）不同剂量的IL-8对Luciferase报告基因表达的影响。
以Luciferase为报告基因时，EC50为0.91ng/ml。灵敏度比碱性磷 酸酶做报告基因高5倍（EC50=5.16ng/ml）。
图例二）以细胞数为基准，检测荧光素酶，标准曲线如上图。测得RLU如下：
| 细胞数 | 0 | 5312.5 | 10625 | 21250 | 42500 | 85000 | 170000 |
| RLU | 151 | 4341 | 7878 | 20096 | 45600 | 98210 | 192675 |
注意事项：
1、样品和测定试剂混合后到测定前的时间应尽量控制在相同时间内，例如30秒内。
2、测定时样品和试剂均需达到室温后再进行测定，以减少温度对酶反应有影响。
3、建议适当分装后避光保存，避免反复冻融和长时间暴露于室温。三次以内的冻融对测定结果无明显影响。
4、样品和测定试剂混合后，必须等待1-2秒，再进行测定。测定时间通常为10秒，根据情况也可以测定更长或更短时间，但是同一批样品zuì好使用相同的测定时间。
储存条件：-20℃，有效期6个月。
我公司销售的荧光素酶检测试剂盒质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验【求助】请问将含荧光素酶报告基因的质粒转染到真核细胞中，建立稳定的细胞系，用哪种转染方法比较好？中间有什么细节是值得注意的
谢谢，但是我看很多外文文献都是用的脂质体转染法，磷酸钙转染相对有什么好处 zhuzhu19820515 脂质体转染，效果不错的。慢病毒太贵，不过经费充足那就没问题。 vigorousbio 非脂质体阳离子转染 vigofect 很好用，配套的还有双荧光素酶报告基因检测试剂盒————威格拉斯品牌 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴
一、TUNEL法的实验原理 细胞发生凋亡时, 染色体DNA双链或单链断裂产生大量的粘性3'-OH末端，可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下，将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端，从而可进行凋亡细胞的检测，这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal -deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL)。由于正常的或正在增殖
时间通常为10秒，根据情况也可以测定更长或更短时间，但是同一批样品最好使用相同的测定时间。 为避免由于质粒 转细胞时效率的差异而带来的误差，可以同时转入Renilla荧光素酶的报告基因质粒作为内参，采用双荧光素酶报告基因检测 试剂盒进行检测;也可以同时转入β-半乳糖甘酶报告基因质粒作为内参，然后采用β-半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒进行检测。采用荧光素酶报告基因检测试剂盒中的报告基因 细胞 裂解液裂解获得的样品，可以直接用于β-半乳糖苷酶报告基因 检测试剂盒中的测定。
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