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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
43
- 英文名:
PMSF 苯甲基黄酰氟
- CAS号:
详见说明书
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海谷研
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
1g
1. 贴壁细胞的消化:
a) 吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
b) 加入少量胰蛋白酶消化液,盖过细胞即可,室温放置1-2分钟。不同的细胞消化时间有所不同,对于贴壁牢固的细胞可适当延长消化时间。
c) 显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除消化液。加入含血清的细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
d) 如果发现消化不足,可加入胰蛋白酶消化液重新消化。
e) 如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2. 组织的消化:
不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
实验室常见故障的处理方法:
1. 螺旋瓶盖太过紧固不易打开:
当螺旋瓶盖拧不开时,可用电吹风或小火焰烘烤瓶盖周围,使其受热膨胀,再用于布包住瓶盖用力将其旋开。
2. 清除仪器上的特殊污垢:
在回流操作或浓缩溶液时,经常会有结晶析出在液面上方的烧瓶内壁上,且附着牢固,不仅不能继续参加反应,有时还会因热稳定性差而逐渐分解变色。
| 产品名称 | PMSF 苯甲基黄酰氟价格 |
| 规格 | 1g |
| 单位 | 瓶 |
PMSF 苯甲基黄酰氟价格操作步骤:
1、 按实验具体要求操作或参考下列革兰氏染色的方法。
2、 涂片:取待检细菌,于载玻片中央涂成薄层或者在载玻片上滴加少许无菌水,取菌与水混合均 匀,涂成薄层。
3、 干燥:涂片后在室温下自然干燥,也可在酒精灯上略加温,使之迅速干燥。
4、 固定:手持载玻片一端,标本面朝上,在酒精灯的火焰外侧快速来回移动。
5、 初染:滴加结晶紫染色液染色,清水冲洗去染色液。
6、 媒染:滴加Gram碘液,并覆盖载玻片室温放置,水洗。
7、脱色:滴加脱色液摇动,直至流下的脱色液不出现紫色为止,立即用水冲去脱色液,终止反应。
8、 复染:滴加沙黄染色液染色,水洗。
9、 干燥。镜检:置油镜观察。 染色结果: 革兰氏阳性菌:蓝色至紫色;革兰氏阴性菌:红色。
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文献和实验10mmol/L苯甲基磺酰氟(PMSF)溶液 【配制方法】 用异丙醇溶解PMSF成1.74mg/ml(10mmol/L),分装成小份贮存于-20℃。如有必要可配成浓度高达17.4mg/ml的贮存液(100mmol/L)。 【注意】 PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛
10mmol/L苯甲基磺酰氟(PMSF)溶液 【配制方法】 用异丙醇溶解PMSF成1.74mg/ml(10mmol/L),分装成小份贮存于-20℃。如有必要可配成浓度高达17.4mg/ml的贮存液(100mmol/L)。 【注意】 PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤,吸入、吞进
使细胞内蛋白质或核酸水解酶释放到溶液中,使大分子生物降解,导致天然物质量的减少,加入二异丙基氟磷酸(DFP)可以抑制或减慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入苯甲磺酰氟化物(PMSF)也能清除蛋白水解酥活力,但不是全部,还可通过选择pH、温度或离子强度等,使这些条件都要适合于目的物质的提取
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