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- 辉睿
- BD-Ⅱ-201
- 上海
- 2025年07月07日
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辉睿
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huiruibio
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文献和实验一、反应曲线 首先，我们了解一下化学反应的时间与吸光度一个曲线图，可以划分为四个区：延迟区、等速区、过渡区和平衡区，如下图所示： 二、反应原理 对于延迟区来讲，无规律可寻，对于指标检测没有意义。 等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法，是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时，连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点，并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等，此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入
悬液（4步骤处理过的细胞悬液）于载玻片上，并用盖玻片盖上细胞。在荧光显微镜下用双色滤光片观察。 B．贴壁细胞 一、流式细胞仪检测 按照实验方案进行凋亡诱导，将培养基吸出转移至干净离心管内（待用），用无钙、镁离子的PBS清洗培养瓶细胞一次。 培养瓶中加入适量的胰酶消化细胞，室温孵育至轻轻吹打可使贴壁细胞脱落，吸除胰酶消化液，避免胰酶消化过度。 注意：对于贴壁细胞，胰酶消化步骤很关键。胰酶消化时间如果过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，从而导致细胞坏死的假阳性；消化时间如果过长，同样
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