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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
35
- 英文名:
胰蛋白酶消化液(0.25%) 不含EDTA和酚红
- CAS号:
详见说明书
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海谷研
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100ml
| 产品名称 | 胰蛋白酶消化液(0.25%) 不含EDTA和酚红说明书 |
| 规格 | 100ml |
| 单位 | 瓶 |
1. 贴壁细胞的消化:
a) 吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
b) 加入少量胰蛋白酶消化液,盖过细胞即可,室温放置1-2分钟。不同的细胞消化时间有所不同,对于贴壁牢固的细胞可适当延长消化时间。
c) 显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除消化液。加入含血清的细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
d) 如果发现消化不足,可加入胰蛋白酶消化液重新消化。
e) 如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2. 组织的消化:
不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
实验室常见故障的处理方法:
1. 螺旋瓶盖太过紧固不易打开:
当螺旋瓶盖拧不开时,可用电吹风或小火焰烘烤瓶盖周围,使其受热膨胀,再用于布包住瓶盖用力将其旋开。
2. 清除仪器上的特殊污垢:
在回流操作或浓缩溶液时,经常会有结晶析出在液面上方的烧瓶内壁上,且附着牢固,不仅不能继续参加反应,有时还会因热稳定性差而逐渐分解变色。
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250克兔热休克蛋白90(HSP-90)ELISA Kit,48T/96T 进口、国产Cary-Blair Transfort MediumTissue factor/CD142/F3 组织因子抗体
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250克马β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA Kit,48T/96T 进口、国产Brilliant Green Lactose MediumAEV polyprotein 禽脑脊髓炎病毒AEV抗体
250克小鼠β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA Kit,48T/96T 进口、国产Lecithin Tween 80 Nutrient AgarEBNA 3B EB病毒核抗原-3B抗体
250克大鼠β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA Kit,48T/96T 进口、国产Acetamide AgarADFP 脂肪组织分化相关蛋白抗体
250克兔β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA Kit,48T/96T 进口、国产SCDLP Broth MediumLMP2A EB病毒LMP-2A蛋白抗体
250克人肟前列D2(PGD2-MOX)ELISA Kit,48T/96T 进口、国产Cetrimide AgarADAM2 去整合素样金属蛋白酶2抗体
250克人状旁激素(PTH)ELISA Kit,48T/96T 进口、国产Common Nutrient AgarMLCK 肌球蛋白轻链激酶抗体
250克小鼠状旁激素(PTH)ELISA Kit,48T/96T 进口、国产King Medium AAcetyl-Histone H4(K5) 酰化组蛋白H4抗体
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胰蛋白酶消化液(0.25%) 不含EDTA和酚红说明书PsoralenHPLC≥98% 试剂盒 组装/原装
AtractylodinHPLC≥98% 试剂盒 组装/原装
Bulleyaconitine AHPLC≥98% 试剂盒 组装/原装
HerbacetinHPLC≥98% 试剂盒 组装/原装
RhodioninHPLC≥98% 试剂盒 组装/原装
FraxinelloneHPLC≥98% 试剂盒 组装/原装
TheaflavinHPLC≥95% 试剂盒 组装/原装
Theaflavin-3'-gallateHPLC≥95% 试剂盒 组装/原装
胰蛋白酶消化液(0.25%) 不含EDTA和酚红说明书操作步骤:
1、 按实验具体要求操作或参考下列革兰氏染色的方法。
2、 涂片:取待检细菌,于载玻片中央涂成薄层或者在载玻片上滴加少许无菌水,取菌与水混合均 匀,涂成薄层。
3、 干燥:涂片后在室温下自然干燥,也可在酒精灯上略加温,使之迅速干燥。
4、 固定:手持载玻片一端,标本面朝上,在酒精灯的火焰外侧快速来回移动。
5、 初染:滴加结晶紫染色液染色,清水冲洗去染色液。
6、 媒染:滴加Gram碘液,并覆盖载玻片室温放置,水洗。
7、脱色:滴加脱色液摇动,直至流下的脱色液不出现紫色为止,立即用水冲去脱色液,终止反应。
8、 复染:滴加沙黄染色液染色,水洗。
9、 干燥。镜检:置油镜观察。 染色结果: 革兰氏阳性菌:蓝色至紫色;革兰氏阴性菌:红色。
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文献和实验酚红 0.02g 溶于1000ml水中 染色体的G带核型实验中胰蛋白酶用生理盐水配制。 二、EDTA溶液 又称versene,一般用其钠盐,因可溶性较好。有些组织需要Ca2+ 、Mg2+ 来保持其完整性,用EDTA来排除这些离子,可使细胞之间裂解,以分散细胞。其作用比胰蛋白酶缓和。使用浓度为0.02%,以无钙、镁的平衡
问:我购买的是GIBCO 0.25%(w/v)胰蛋白酶(25200-072)如何稀释成0.1%(w/v)? 答:用D-Hank,s液按一定的比例配置即可。 答:那要看你平时用什么缓冲液了。pbs,还是D-hanks?用你平时的那种缓冲液就行了。
动物细胞培养中Hanks液、D-Hanks液和消化液的配制方法
组织块则为0.1%或0.125%。 实验材料与用品: ***材料:3 000 mL锥形瓶,25 mL、50 mL试剂瓶,500 mL输液瓶,螺口盖,翻帽塞,pH试纸,孔径0.22μm的微孔滤膜。 ***药品:NaCl,Na2HP04,KH2P04,KCl,酚红,NaHC03,胰蛋白酶干粉,0.02%EDTA ,CaCl2,D-葡萄糖,MgCh·6H20,MgS04·7H20,酚红(0.1%)(配法:称酚红2 g,置于研磨器中,先用数滴5.6%的NaHCO3溶液溶解并研磨,再加
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