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· DNA 拓扑异构酶I 说明
DNA 拓扑异构酶I (DNA Topoisomerase I)催化4种反应:
1)催化负超螺旋DNA的松弛。
2) 在单链环状DNA分子内形成绳结(Knot t ing) 和解开绳结(Unknotting)。
3)催化具有互补碱基序列的环状单链DNA形成双链闭环状DNA分子。
4)2个环状双链DNA分子之中的一个存在DNA链的切口时,发生两个分子的连结反应(Catenation)或者逆反应(Decatenation)。
完整的DNA 拓扑异构酶I(E. coli)全酶是一分子量97 kDa的蛋白。本DNA 拓扑异构酶I是把topA基因(E. coli)在大肠杆菌中进行表达后,经多次纯化分离而得到的。
· 质量保证
本DNA 拓扑异构酶I 经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,无核酸内、外切酶污染。
· 使用建议
DNA的结构转换和解析。
· 其他说明
详细内容请参考说明书
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文献和实验为催化 DNA拓扑学异构体相互转变的酶之总称。催化 DNA链断开和结合的偶联反应,为了分析体外反应机制,用环状 DNA为底物。在闭环状双链 DNA的拓扑学转变中,要暂时的将 DNA的一个链或两个链切断,根据异构体化的方式而分为二个型。切断一个链而改变拓扑结构的称为Ⅰ型拓扑异构酶( top- oisomeraseⅠ),通过切断二个链来进行的称为Ⅱ型拓扑异构酶( topoisomeraseⅡ)。属于Ⅰ型的拓扑异构酶,有大肠杆菌的ω蛋白(ω -protein,由分子量 11万
酶组织化学酶显示方法 1.偶联偶氮色素法 此法又称偶氮色素法(couplingazo dyemethod),是指用某种人工合成底物在酶作用下产生分解产物,分解产物与重氮盐结合,引起偶联偶氮反应,形成不溶性偶氮色素,以此对酶定位。常用的底物是萘酚系列化合物,如l―萘酚、2―萘酚、6―溴―2―萘酚、萘酚AS、萘酚AS衍生物等。由于重氮盐的种类不同,偶氮色素的颜色也不同,可显示出紫色、蓝色、红色、褐色、棕色和黑色等各种颜色。 重氮盐有不同程度的抑制酶活性作用,因此必须选择抑制作用最弱
存在于胎盘、马睾丸等微粒体部分,使△4 -3- 氧甾醇的 A 环芳构化,变成酚型酶。开始是 19 位的甲基由 19- 羟化酶进行二次羟化成为二羟化物,接着脱水形成 19- 氧代化物,然后,在 10 位与 19 位之间切断的同时失去 1 位与 2 位的氢而成为醌,烯醇化后生成酚。因此,此系统由 19- 羟化酶与 C 10 -C 19 裂解酶构成,均需要分子态氧与 NADPH 。
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