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- HZ15-49200
- 2025年07月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
‘-20℃保存
- 保质期：
有效期一年
- 库存：
30
- 供应商：
上海沪震实业有限公司
- 规格：
50次
PCR试剂盒具有下列特点：
1. 一管式操作，用户只需要提供样品即可。
2. 根据PCR基因保守区域设计引物，能专一性地检测出猪的成分，但不能检测其他非猪类动物成分（如鸡、牛、羊等）。
3. 快速，整个检测过程（按一个样品计）所需时间仅为 2.0 小时。
4. 只需要普通 PCR 仪和凝胶电泳仪，无需配置贵重仪器设备。
5. 对混合样品中猪成分的检测下限为 0.1%，对样品中猪成分的核酸检测下限为 1.0ng/µL。
6. 本只能用于科研，足够 50 次 40uL 体系的常规 PCR。
设计PCR用引物时的注意事项?
可以从以下几个方面考虑。
1. 引物长度通常为20～25 mer。但进行LA PCR时，引物长度应增长为30～35 mer。
2. 二条引物之间不能进行Annealing，对3′端的3个碱基需特别注意。
3. GC含量在50～60%，避开局部富含GC或AT，为了使引物和模板稳定结合，3′端应避开AT rich结构。
4. 避开引物自身形成二级结构。
5. 选择Tm温度相互接近的二条引物。
PCR用引物的Tm值的计算方法?
引物为20 mer以下时：
Tm = 2℃×(A+T) + 4℃×(G+C)
引物为20 mer以上时：
Tm = 81.5 + 0.41×(GC%) - 600/L
其中L为引物的长度。
在PCR反应过程中选择Annealing温度时，一般为 (Tm - 5)℃。
PCR用引物中含有Inosine (次黄苷) 碱基，其Tm值怎样计算?
可以不考虑Inosine碱基，使用A、G、C、T计算Tm值就可以。
PCR用引物的使用量?
合适的终浓度可在0.1 μM～1.0 μM之间选择。引物的浓度太低时，有时扩增产物太少；引物浓度太高时，比较容易出现非特异性扩增反应。通常模板DNA的量较多或High complexity DNA (例如Human genome DNA) 作模板时，引物浓度应低一些；当模板DNA的量较少或Low complexity DNA (例如Plasmid等) 作模板时，引物浓度应高一些。
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文献和实验相关实验
新型冠状病毒背景介绍与核酸检测整体解决方案分享，从核酸模板制备到 RT 实验策略，再到 qPCR 实验解析与应用。
了我的扩增曲线呢？ 其实，这种现象并不是偶发的，有很多原因可能导致，并且有个专属名称「Hook Effect」，翻译过来叫「鱼钩效应」。「鱼钩效应」指在荧光定量 PCR 过程中，DNA 扩增到指数增长期后出现的一种荧光信号不能保持稳定（或者上升）而出现下降的现象 [1]。 导致扩增曲线出现这一现象的因素比较复杂，这里我们分别从嵌入性染料法与探针法两种定量方式的角度为大家解释： 嵌入性染料法： 嵌入性染料法（例如 SYBR Green I）产生「鱼钩效应」主要是由于模板序列混杂，在 PCR
实时荧光定量 PCR 技术（Quantitative Real-time PCR，简称 qPCR）是在 PCR 扩增过程中，通过实时监测荧光信号的变化，达到对待检测样本中初始模板定量分析的方法。当前 qPCR 技术被广泛应用于临床疾病诊断，动物疾病监测，食品安全分析等领域。随着 2020 年新冠疫情在全球的蔓延，qPCR 技术更是因其检测通量高，速度快，操作简便等优势成为新冠病毒核酸检测的有效方法被众人所熟知。 那么为了得到可靠、准确的检测结果，我们需要注意哪些方面呢？其实决定一次实验成功
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