一次性500ml 摇瓶 透气盖 灭菌

碱裂解法大量提取质粒（500mL菌液）

10g 三、溶液Ⅲ配制(用乙酸调Ph4.8) 溶液Ⅲ组成：乙酸钾，冰乙酸。两种物质在溶液Ⅲ中的终浓度分别为：5mol/L乙酸钾，冰乙酸(由溶液Ⅲ体积决定)，即配制100体积溶液Ⅲ：60体积5mol/L乙酸钾，11.5体积冰乙酸，28.5体积灭菌水。 例如：预配制100mL溶液Ⅲ： 5mol/L乙酸钾： 60.0mL 冰乙酸： 11.5mL 灭菌水： 28.5mL 配制体积 500mL 1000mL

消毒与灭菌

１、试管母种培养基经灭菌后，从高压灭菌锅中不同部位随机抽取５支，放置28±2℃恒温箱中培养5-7天,如无霉菌、细菌、酵母等杂菌出现，则认为灭菌彻底。 ２、原种及栽培种培养基经灭菌后，从灭菌锅中上、中、下三层进行取样，每层对角线随机取样５瓶（袋），放置28-30℃恒温培养箱中培养5-7天，检查是否有霉菌菌落生成。如检查是否有细菌没有杀死，必须使用细菌培养基进行检测。细菌培养基：称取牛肉浸膏(或牛肉汁)10克,蛋白胨10克,NaCl15克,琼脂粉14 克, 加蒸馏水1000ml,经加热溶解

培养基的配制和灭菌

素B1、B12、C和泛酸、抗生素、酶、植物 提取液（活性丧失）。所以，原生质体培养用培养基应采用过滤法灭菌。 表4 培养基或无菌水的最少灭菌时间 容器分装体积（mL） 121℃下最少灭菌时间（min） 20~60 15 75~150 20 250~500 25 1000以上 30以上 过滤灭菌可以除去溶液或液体培养基中直径大于过滤膜网孔直径的微粒、微生物 和病毒。与高压蒸气灭菌法相比，该法不会改变那些在高压蒸气灭菌中不稳定物质，但是也有些明显的缺点