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- 百奥莱博
- MT0083-WTY
- 北京
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
351
- 英文名：
TEV Protease
- 保质期：
2年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
1000U
特别提示：包括TEV蛋白酶在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：TEV蛋白酶
英文名称：TEV Protease
产品货号：MT0083
产品规格：1000U
本品是经过基因工程改造后的重组蛋白酶，它可特异性识别Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Gly七氨基酸序列，并高特异性、高活性剪切(剪切位点在Gln-Gly之间)。TEV蛋白酶经6XHis标签纯化而得(含组胺酸标签)，纯度达99％，剪切反应完毕后可通过Ni-NTA Resin(货号：MT0081)去除。TEV酶在4℃-30℃温度、pH范围（6.0～8.5）反应条件下均具有活性(见下表)。本品主要用于融合蛋白标签剪切去除。
| 不同温度下剪切活性(%) | ||||
| 4℃ | 16℃ | 21℃ | 30℃ | |
| 0.5 h | 34 | 58 | 56 | 70 |
| 1 h | 58 | 80 | 78 | 90 |
| 2 h | 71 | 99 | 99 | 99 |
| 3 h | 84 | 99 | 99 | 99 |
产品组成：
| 组分 | 规格 |
| TEV Protease(10U/μl) | 100μl |
| 20×TEV Buffer | 1ml |
| 0.1M DTT | 100μl |
保存条件：长期储存-70℃，可储存2年，-20℃可储存6个月。
单位定义：在1×TEV Buffer，30℃反应1h，剪切＞85％的3μg底物所需要的酶量定义为一个活性单位。
应用实例：
重组表达的SUMO-TEV-Y融合蛋白经rTEV酶切后去除SUMO融合标签。
M：Protein Marker；
泳道1：纯化后的SUMO-TEV-Y蛋白；
泳道2：1μl TEV蛋白酶酶切1h产物；
泳道3：1μl TEV蛋白酶酶切3h产物。
操作方法：
1．在EP管中配制如下反应体系：
融合蛋白————————20μg
20×TEV Buffer—————7.5μl
0.1M DTT————————1.5μl
TEV 蛋白酶———————1～3μl
ddH2O—————————-Up to 150μl
2．30℃孵育，在1、2、4、6小时分别吸出30μl上述反应液，置于单独的EP管中。
3．向上述EP管中加入30μl 2×SDS Loading Buffer，置于-20℃。
4．样品全部反应完毕后，样品煮沸5分钟，取40μl进行SDS-PAGE分析。
5．如融合蛋白要求低温处理，可将反应液置于4℃，请延长反应时间，并增加TEV蛋白酶用量。
我公司销售的TEV蛋白酶，TEV Protease质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验蛋白的损失。 如何进行柱上酶切 柱上酶切纯化路线比较简单，只需上样后加入蛋白酶，在合适的温度下进行孵育一段时间，经过清洗便可得到纯度较高的无标签的目标蛋白。 去除标签的关键在于选择高效的蛋白酶并构建相应的氨基酸识别序列。下表展示的是几种常见的内切酶及对应酶切位点。 组氨酸标签由于分子量小通常不需要去除。如有必要，可使用 TEV 蛋白酶去除组氨酸标签。由于TEV酶带有六组氨酸标签，因此可实现柱上酶切而得到高纯度无标签的目标蛋白。 PreScission
strep-tag 对 Strep-Tactin XT的亲和力，大规模纯化 CB2 蛋白；然后通过 WB 检测 MBP-CB2 的表达情况，G 蛋白激活实验检测 CB2 的功能活性。 3、CB2 蛋白的纯化的策略：根据不同构建载体表达的情况及 Strep-Tactin 亲和力的测试，作者通过串联亲和层析对 CB2 蛋白进行纯化，分别使用 C 端 His10 和 N 端 twin-Strep-tag。首先使用 Ni-resin 进行第一步纯化后，再从含有 CB2 蛋白的粗提物进行透析，用 TEV 蛋白酶
后的目标蛋白产量范围在1.5-100mg/L。趋化因子和细胞因子可以得到高达30-100mg/L的产量。其它关于这些蛋白表达和纯化的有参考价值信息包括： ■ 植物磷酸烯醇式丙酮酸—羧化酶激酶（Ermolova 2003）——目标蛋白切除标签后用BDA（蓝色葡聚糖）亲和层析树脂纯化。纯化后蛋白的催化活性比未切除标签的融合蛋白高50倍。 ■ Xklp3a，Tep3Ag和E8R（De Marco 2004）——用蛋白酶切割后，His-融合的TEV和NusA被Ni2+离子亲和色谱选择性去除
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