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大量PCR产物DNA纯化试剂盒(20μg)

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  • 百奥莱博
  • 北京
  • 2025年07月15日
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    • 英文名

      Mass DNA purification kits for PCR products

    • 保质期

      12个月

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      RT(15-25℃)干燥条件下,可

    • 规格

      50次

    特别提示:包括大量PCR产物DNA纯化试剂盒(20μg)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


    产品名称:大量PCR产物DNA纯化试剂盒(20μg)
    英文名称:Mass DNA purification kits for PCR products
    产品货号:WH0044
    产品规格:50次

    本试剂盒使用独特的离心吸附柱高效、专一地与DNA片段结合,同时zuì大限度除去蛋白质、离子及引物小片段等杂质。除了可用于PCR产物回收,对于一些酶反应液回收(酶切、连接、探针标记等)也同样适用。可回收100 bp-20 kb DNA片段,回收率可高达80%以上(< 100bp或> 10 kb的DNA片段,回收率为30%-50%)。得到的DNA可直接用于连接、转化、酶切、测序、杂交等分子生物学实验。

    产品特点:
    ·速度zuì快:15min完成DNA回收,可同时处理多个样品,节省时间。
    ·步骤zuì少:操作简单,几次离心即可完成。
    ·效率zuì高:独特的离心柱和精心配制的缓冲液保证每次zuì大量回收到纯度极高的目的DNA。
    ·处理量:每个离心吸附柱每次zuì多可吸附的DNA量为20μg。

    试剂盒组成:
    组分 50T
    平衡液BL 30ml
    结合液PB 60ml
    漂洗液PW 15ml
    洗脱缓冲液EB 15ml
    吸附柱CB3 50个
    收集管(2ml) 50个

    保存条件:室温(15-25℃)干燥条件下,可保存12个月,更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下,若溶液产生沉淀,使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间,必要时可在37℃水浴中预热10 min,以溶解沉淀。

    注意事项:(请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项)
    1.本试剂盒适用于无选择性的回收溶液中所有DNA片段(可去除50 bp以下的小片段),如需选择性回收特定片段,同时去除其他不同大小片段,请选择胶回收试剂盒。
    2.洗脱缓冲液加量应根据回收前DNA量来决定:如回收前DNA只有1-5 μg左右,则应选用少量型离心柱,加20-50μl洗脱缓冲液;回收前为5-20μg左右的DNA,应选用普通型离心柱,加30-100 μl洗脱缓冲液;如回收前有20-30 μg左右DNA,则应选用大量型离心柱,加50-300 μl洗脱缓冲液。
    3.回收率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越少,回收率越低。
    4.对于<100 bp和>10 kb的DNA片段可以适当的增加吸附和洗脱的时间。
    5.平衡液BL的加入能够改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和稳定性,消除高温/潮湿或其他不良环境因素对吸附柱造成的影响。使用前请先检查平衡液BL是否出现浑浊,如有混浊现象,可在37℃水浴中加热几分钟,即可恢复澄清。
    6.用平衡液处理过的柱子zuì好当天使用,放置时间过长会影响效果。

    使用方法:
    使用前请先在漂洗液PW中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

    1.柱平衡步骤:向吸附柱CB3中(吸附柱放入收集管中)加入500 μl的平衡液BL,12000rpm(~13400×g)离心1 min,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。(请使用当天处理过的柱子)
    2.估计PCR反应液或酶切反应液的体积,向其中加入5倍体积的结合液PB,充分混匀(无需去除石蜡油或矿物油)。
      注意:如PCR反应体系为100 μl(不包括石蜡油体积),则加入500 μl结合液PB。
    3.将上一步所得溶液加入一个吸附柱CB3中(吸附柱放入收集管中),室温放置2 min,12000rpm(~13400×g)离心30-60 sec,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CB3放入收集管中。
      注意:吸附柱容积为800 μl,若样品体积大于800 μl可分批加入。
    4.向吸附柱CB3中加入600 μl漂洗液PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm(~13400×g)离心30-60 sec,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CB3放入收集管中。
      注意:如果纯化的DNA是用于盐敏感的实验,例如平末端连接实验或直接测序,建议PW加入后静置2-5 min再离心。
    5.重复操作步骤4。
    6.将离心吸附柱CB3放回收集管中,12000rpm(~13400×g)离心2 min,尽量除去漂洗液。将吸附柱置于室温放置数分钟,彻底地晾干,以防止残留的漂洗液影响下一步的实验。
      注意:漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。
    7.取出吸附柱CB3放入一个干净的离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加适量洗脱缓冲液EB,室温放置2 min。12000rpm(~13400×g)离心2 min,收集DNA溶液。
      注意:洗脱液的体积不应少于50μl,体积过少会影响回收的效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若后续做测序,需使用ddH2O做洗脱液,并保证其pH值在7.0-8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率;且DNA产物应保存在-20℃,以防DNA降解。DNA也可以用缓冲液(10mM Tris-Cl,pH8.0)洗脱。为了提高DNA的回收量,可将离心得到的溶液重新加回离心吸附柱中,再次离心。

    DNA浓度及纯度检测:
    1.回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。
    2.DNA应在OD260处有显著吸收峰,OD260值为1相当于大约50μg/ml双链DNA、40μg/ml单链DNA。
    3.OD260/OD280比值应为1.7-1.9,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用ddH2O,比值会偏低,因为pH值和离子存在会影响光吸收值,但并不表示纯度低。

    我公司销售的大量PCR产物DNA纯化试剂盒(20μg),大量DNA产物纯化试剂盒质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。

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