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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
Glycollic Oxidase(GO)Activity Assay Kit
- 库存:
现货
- 供应商:
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号:
BC1970-50T/24S
- 规格:
50管/48样
乙醇酸氧化酶(GO)活性检测试剂盒说明书
紫外分光光度法
货号:BC2010
规格:50T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 液体40 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 粉剂×2瓶 | -20℃保存 |
| 试剂三 | 液体6 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
- 试剂二:临用前加入6 mL蒸馏水溶解,用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
乙醇酸氧化酶(EC1.1.3.15)是乙醇酸循环中的一种酶,也是植物光呼吸代谢中的关键酶,催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,通过测定乙醇酸氧化酶活性,可以了解植物光合和呼吸代谢的基本方法。
乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,乙醛酸和*反应生成乙醛酸苯腙,在324nm有特征吸收峰。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、低温离心机、可调式移液枪、1mL石英比色皿、天平、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料”附件
注意事项:
- 测定之前进行预实验,若吸光值A1>1,请将样本用提取液进行适当的稀释再测定,并在计算公式中乘以稀释倍数。
- 色素含量较高的样本,可在提取酶时加活性炭吸附。
- 空白管为检测各试剂组分质量的检测孔,正常情况下,其OD值变化不超过0.02。
- 称取约0.1g三叶草组织,加入1mL提取液,进行冰浴匀浆,然后10000g,4℃,离心10min,取上清进行检测,测得ΔA测定管=A2测定-A1测定=0.868-0.773=0.095,ΔA空白管=A2空白-A1空白=0.027-0.013=0.014,ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管=0.095-0.014=0.081,按样本质量计算酶活得:
- 称取约0.1g菠菜组织,加入1mL提取液,进行冰浴匀浆,然后10000g,4℃,离心10min,取上清稀释2倍进行检测,测得ΔA测定管=A2测定-A1测定=0.873-0.778=0.095,ΔA空白管=A2空白-A1空白=0.027-0.013=0.014,ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管=0.095-0.014=0.081,按样本质量计算酶活得:
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文献和实验一、检测原理 Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中,没有活性;在细胞发生凋亡阶段,Caspase被激活,活化的Caspase可裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。 Caspase分光光度法检测试剂盒的原理是将Caspase序列特异性的多肽偶联至黄色发光基团pNA (p-nitroaniline)。当该底物被活化的Caspase剪切后,黄色
度。 (2) 吸收系数法 按各品种项下的方法配制供试品溶液,在规定的波长处测定其吸收度,再以该品种在规定条件下的吸收系数计算含量。用本法测定时,应注意仪器的校正和检定。 (3) 计算分光光度法 采用计算分光光度法应慎重。本法有多种,使用时均应按各品种项下规定的方法进行。当吸收度处在吸收曲线的陡然上升或下降的部位测定时,影响精度的因素较多,故对照品和供试品测试条件应尽可能一致。若测定时不用对照品,如维生素A测定法,则应在测定时对仪器作仔细的校正和检定。
蛋白的考马斯亮兰溶液连续进样6次,得到吸光度的相对标准偏差。表1 精密度测定结果 2.3 稳定性 取1mg/ml牛 血清 蛋白标准溶液每十分钟测定一次,50分钟内的吸光度变化如下表2。表2 稳定度测定结果 3. 结论该方法测定快速、简便,干扰物少,是目前灵敏度较高的蛋白质含量测定的紫外分光光度法。









