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- Solarbio
- 北京
- BC3990
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Soil aryl sulfatase activity assay kit
- 库存：
999
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号：
BC3990-50T/24S
- 规格：
50管/24样
土壤芳基硫酸酯酶（S-ASF）活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
货号：BC3990
规格：50T/24S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
| 试剂一 |
液体3mL×1 瓶（自备） |
2-8℃保存 |
| 试剂二 |
液体30mL×1瓶 |
2-8℃保存 |
| 试剂三 |
粉剂×2瓶 |
-20℃保存 |
| 试剂四 |
液体60mL×1瓶 |
2-8℃保存 |
| 标准品 |
液体1mL×1支 |
2-8℃保存 |
溶液的配制：
1、 试剂一：甲苯自备；
2、 试剂三：临用前取1瓶加入10mL蒸馏水，充分溶解备用，用不完的试剂-20℃分装保存一周，避免反复冻融；
3、 标准品：5mmol/L的对硝*苯*溶液。临用前用试剂二将标准品稀释50倍得100μmol/L的标准溶液。（具体稀释过程见操作步骤）
产品说明：
土壤芳基硫酸酯酶来自于土壤微生物，能酶促土壤有机硫化物转化为植物可吸收的无机态硫，在硫素的生物化学循环和植物的硫营养代谢中具有重要的作用，是反映土壤质量的一个重要生物学指标。
S-ASF能够催化对-硝*苯硫酸钾生成对-硝*苯酚，后者在410nm有特征光吸收。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、台式离心机、恒温水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、研钵、冰、30-50目筛、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30-50目筛。
二、测定步骤
1、 分光光度计预热30min，波长调至410nm，蒸馏水调零。
2、 标准溶液的稀释：取20μL 5mmol/L的对硝*苯*溶液，加入980μL试剂二，充分混匀，配制成100μmol/L标准液待测，现用现配。（实验中每管需要500μL，为减小实验误差，故配制大体积。）
3、 加样表：
| 试剂名称（μL） |
测定管 |
对照管 |
标准管 |
空白管 |
| 风干土样（g） |
0.1 |
0.1 |
- |
- |
| 试剂一 |
50 |
50 |
- |
- |
| 充分振荡混匀，使土样全部潮湿，室温放置15min |
- |
- |
||
| 试剂二 |
500 |
500 |
- |
- |
| 试剂三 |
400 |
- |
- |
- |
| 充分混匀，置于37℃水浴锅或37℃恒温培养箱反应1h后，立即沸水浴5min（盖紧，缠封口膜，防止水分散失），流水/冰浴冷却。 |
- |
- |
||
| 试剂三 |
- |
400 |
- |
- |
| 10000rpm，25℃离心10min，取上清液待测 |
- |
- |
||
| 上清液 |
500 |
500 |
- |
- |
| 标准品 |
- |
- |
500 |
- |
| 蒸馏水 |
- |
- |
- |
500 |
| 试剂四 |
1000 |
1000 |
1000 |
1000 |
充分混匀，常温静置2min后，吸取1mL反应液于1mL玻璃比色皿中，测定吸光值A，分别记为A测定管、A对照管、A标准管、A空白管。计算ΔA测定=A 测定管-A对照管，ΔA标准=A标准管-A空白管。每个测定管需设一个对照管。标准管和空白管只需检测1-2次。
三、S-ASF活力计算
单位的定义：每天每g土样中产生1μmol对-硝*苯酚定义为一个酶活力单位。
S-ASF活力（U/g 土样）=ΔA测定÷ (ΔA标准÷C标准)×V反总÷W÷T=2.28×ΔA测定÷ΔA标准÷W
T：反应时间，1h=1/24d；V反总：反应体系总体积：9.5×10-4L；C标准：标准溶液浓度，100μmol/L；W：样本质量，g。
实验实例：
1、 分别称取两管0.1g三叶草土样，分别记为测定管和对照管，按照测定步骤操作，用1mL玻璃比色皿测得计算ΔA测定=A测定管-A对照管=0.627-0.108=0.519，ΔA标准=A标准管-A空白管=0.568-0.002=0.566，计算酶活得：
S-ASF活力（U/g 土样） =0.456×ΔA测定÷ΔA标准÷W=2.28×0.519÷0.566÷0.1=20.9067 U/g 土样。
2、 分别称取两管0.1g土样，分别记为测定管和对照管，按照测定步骤操作，用1mL玻璃比色皿测得计算ΔA测定=A测定管-A对照管=0.442-0.102=0.34，ΔA标准=A标准管-A空白管=0.568-0.002=0.566，计算酶活得：
S-ASF活力（U/g 土样） =0.456×ΔA测定÷ΔA标准÷W=2.28×0.34÷0.566÷0.1=13.69611 U/g 土样。
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文献和实验|
AuthorWen Chen, Sifu Li, Dingyi Bai, Zongfang Li, Haozhe Liu, Lianyang Bai, Lang Pan
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Publish_toECOTOXICOLOGY AND ENVIRONMENTAL SAFETY
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|
IF6.8000
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PMID37473705
|
一、检测原理 Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中，没有活性；在细胞发生凋亡阶段，Caspase被激活，活化的Caspase可裂解相应的胞浆胞核底物，最终导致细胞凋亡。 Caspase分光光度法检测试剂盒的原理是将Caspase序列特异性的多肽偶联至黄色发光基团pNA (p-nitroaniline)。当该底物被活化的Caspase剪切后，黄色
度。 （2） 吸收系数法 按各品种项下的方法配制供试品溶液，在规定的波长处测定其吸收度，再以该品种在规定条件下的吸收系数计算含量。用本法测定时，应注意仪器的校正和检定。 （3） 计算分光光度法 采用计算分光光度法应慎重。本法有多种，使用时均应按各品种项下规定的方法进行。当吸收度处在吸收曲线的陡然上升或下降的部位测定时，影响精度的因素较多，故对照品和供试品测试条件应尽可能一致。若测定时不用对照品，如维生素A测定法，则应在测定时对仪器作仔细的校正和检定。
一、测定溶液中物质的含量 可见或紫外分光光度法都可用于测定溶液中物质的含量。测定标准溶液（浓度已知的溶液）和未知液（浓度待测定的溶液）的吸光度，进行比较，由于所用吸收池的厚度是一样的。也可以先测出不同浓度的标准液的吸光度，绘制标准曲线，在选定的浓度范围内标准曲线应该是一条直线，然后测定出未知液的吸光度，即可从标准曲线上查到其相对应的浓度。 含量测定时所用波长通常要选择被测物质的最大吸收波长，这样做有两个好处： ⑴灵敏度大，物质在含量上的稍许变化将引起较大的吸光度差异； ⑵可以避免
