- ￥480
- Solarbio
- 北京
- BC1130
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
NAD Malic Enzyme(NAD-ME) Activity Assay Kit
- 库存：
99
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号：
BC1130-50T/48S
- 规格：
50管/48样
NAD-苹果酸酶（NAD-ME）活性检测试剂盒说明书
紫外分光光度法
货号：BC1130
规格：50T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体70 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 液体40 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂三 | 粉剂×2支 | 2-8℃保存 |
| 试剂四 | 粉剂×2支 | -20℃保存 |
- 试剂二：临用前加入20 mL提取液充分溶解备用；
- 试剂三：临用前每支加1 mL双蒸水充分溶解备用；
- 试剂四：用时每支加500 μL双蒸水充分溶解备用；
- 工作液：在15 mL试剂二中加入2 mL试剂三和1 mL试剂四，可以根据比例现用现配。
ME广泛存在于微生物、培养细胞、动物和植物胞浆中，尤其在植物组织中活性较高。ME催化苹果酸氧化脱羧的可逆反应，产生*酸和CO2，以及伴随NAD(P)+的还原反应，是苹果酸代谢的关键酶。ME活性与生物合成和抗氧化密切相关。近年来植物ME活性测定较多，已经成为抗氧化研究的热点。根据辅酶专一性和对底物特异性的不同，可将ME分为NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。
NAD-ME催化NAD+还原成NADH，在340nm下测定NADH增加速率。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件
实验实例：
- 取0.1g肝加入1mL提取液进行匀浆研磨，取上清，按照测定步骤操作，测得计算ΔA=A2-A1=0.929-0.665=0.264，按样本质量计算酶活得：
参考文献：
- Spampinato C P, Colombo S L, Andreo C S. Interaction of analogues of substrate with NADP-malic enzyme from maize leaves[J]. Photosynthesis research, 1994, 39(1): 67-73.
BC0310/BC0315 辅酶Ⅰ NAD（H）含量检测试剂盒
BC1030/BC1035 NAD激酶（NADK）活性检测试剂盒
BC0630/BC0635 NADH氧化酶（NOX）活性检测试剂盒
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文献和实验- Spampinato C P, Colombo S L, Andreo C S. Interaction of analogues of substrate with NADP-malic enzyme from maize leaves[J]. Photosynthesis research, 1994, 39(1): 67-73.
度。 （2） 吸收系数法 按各品种项下的方法配制供试品溶液，在规定的波长处测定其吸收度，再以该品种在规定条件下的吸收系数计算含量。用本法测定时，应注意仪器的校正和检定。 （3） 计算分光光度法 采用计算分光光度法应慎重。本法有多种，使用时均应按各品种项下规定的方法进行。当吸收度处在吸收曲线的陡然上升或下降的部位测定时，影响精度的因素较多，故对照品和供试品测试条件应尽可能一致。若测定时不用对照品，如维生素A测定法，则应在测定时对仪器作仔细的校正和检定。
蛋白的考马斯亮兰溶液连续进样6次，得到吸光度的相对标准偏差。表1 精密度测定结果 2.3 稳定性 取1mg/ml牛 血清 蛋白标准溶液每十分钟测定一次，50分钟内的吸光度变化如下表2。表2 稳定度测定结果 3. 结论该方法测定快速、简便，干扰物少，是目前灵敏度较高的蛋白质含量测定的紫外分光光度法。
【 实验目的 】 学习紫外分光光度法测定核酸含量的原理和操作方法 【 实验原理 】 核酸、核苷酸及其衍生物都具有共轭双键系统，能吸收紫外光，RNA和DNA的紫外吸收峰在260nm波长处。一般在260nm波长下，每1ml含1µg RNA溶液的光吸收值为0.022~0.024，每1m1含1µg DNA溶液的光吸收值约为0.020，故测定未知浓度RNA或DNA
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