- ￥340
- Solarbio
- 北京
- BC0400
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2-8℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Cytoplasmic Citric Acid Dehydrogenase(ICDHc) Assay Kit
- 库存：
99
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号：
BC0400-50T/48S
- 规格：
50管/48样
胞浆异柠檬酸脱氢酶（ICDHc）活性检测试剂盒说明书
紫外分光光度法
货号：BC0400
规格：50T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体100 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 粉剂×2支 | 2-8℃保存 |
| 试剂三 | 粉剂×2支 | 2-8℃保存 |
- 试剂一：用时加入50 mL提取液溶解；
- 试剂二：用时每支加275 μL双蒸水充分溶解备用；
- 试剂三：用时每支加275 μL双蒸水充分溶解备用；
- 工作液配制：将试剂一、试剂二、试剂三按85：1：1的比例混合，现用现配。
ICDHc（EC 1.1.1.42）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化异柠檬酸脱氢脱羧生成α-酮戊二酸，同时还原NADP+生成NADPH。ICDHc是细胞质中除了磷酸戊糖途径外又一种NADPH重要来源，在逆境中该酶活性通常会发生显著变化。
利用ICDHc催化NADP+还原成NADPH反应，在340nm下测定NADPH浓度的增加，即可反映ICDHc活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
“具体操作步骤详见“产品资料”附件”
注意事项：
1、若A2-A1大于0.5，需将酶液用提取液稀释，使A2-A1小于0.5，可提高检测灵敏度。若初始值A1大于0.5可尝试将酶液用提取液稀释。
2、实验时，试剂二、试剂三和样本在冰上放置，以免变性和失活；工作液37℃水浴放置。
3、比色皿中反应液的温度必须保持37℃，取小烧杯一只装入一定量的37℃蒸馏水，将此烧杯放入37℃水浴锅中。在反应过程中把比色皿连同反应液放在此烧杯中。
4、最好两个人同时做此实验，一个人比色，一个人计时，以保证实验结果的准确性。
实验实例：
- 取0.1g稗草，加入1mL提取液，进行冰浴匀浆，然后8000g 4℃离心10min，取上清，之后按照测定步骤操作，测得计算ΔA=A2-A1=0.240-0.224=0.016，按样本质量计算酶活得：
- 取0.1g小鼠肺部组织，加入1mL提取液，进行冰浴匀浆，然后8000g 4℃离心10min，取上清稀释5倍，之后按照测定步骤操作，测得计算ΔA=A2-A1=0.253-0.141=0.112，按样本质量计算酶活得：
- 取小鼠血清样本直接检测，测得计算ΔA=A2-A1=0.225-0.2=0.025，按血清计算得：
参考文献：
- Miake F, TORIKATA T, KOGA K, et al. Isolation and characterization of NADP+-specific isocitrate dehydrogenase from the pupa of Bombyx mori[J]. The Journal of Biochemistry, 1977, 82(2): 449-454.
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文献和实验| AuthorYongshun Jiang, Sai Cao, Bin Zhou, Qiyue Cao, Mengxue Xu, Tianli Sun, Xinyu Zhao, Zhongyuan Zhou, You Wang | Publish_toSCIENCE OF THE TOTAL ENVIRONMENT |
| IF10.7530 | PMID37146804 |
一、检测原理 Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中，没有活性；在细胞发生凋亡阶段，Caspase被激活，活化的Caspase可裂解相应的胞浆胞核底物，最终导致细胞凋亡。 Caspase分光光度法检测试剂盒的原理是将Caspase序列特异性的多肽偶联至黄色发光基团pNA (p-nitroaniline)。当该底物被活化的Caspase剪切后，黄色
一、反应曲线 首先，我们了解一下化学反应的时间与吸光度一个曲线图，可以划分为四个区：延迟区、等速区、过渡区和平衡区，如下图所示： 二、反应原理 对于延迟区来讲，无规律可寻，对于指标检测没有意义。 等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法，是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时，连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点，并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等，此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入
计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。实验室研究人员希望省钱购入专门仪器定量核酸、蛋白或者细菌的生长情况。例如Amersham Biosciences of Piscataway公司的GeneQuant II能在230、260、280、320、595和600nm的波长下测量样品。如果需要更大的灵活性，研究者可以考虑一种更高性能的宽光谱仪器，可以程序性地进行ELISAs分析和比色分析。紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长，通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱
