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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2-8℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase(G6PDH)Activity Assay Kit
- 库存:
99
- 供应商:
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号:
BC0260-50T/48S
- 规格:
50管/48样
紫外分光光度法
货号: BC0260
规格: 50T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体50 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 液体50 mL×1瓶 | 2-8℃保存(切忌放-20℃) |
| 试剂二 | 粉剂×1支 | 2-8℃保存 |
| 试剂三 | 粉剂×1支 | 2-8℃保存 |
- 试剂二:用时每支加650 μL双蒸水充分溶解备用。
- 试剂三:用时每支加650 μL双蒸水充分溶解备用。
- 工作液配制:临用前将试剂一、试剂二、试剂三以15:0.2:0.2比例混合。
G6PDH(EC 1.1.1.49)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是磷酸戊糖途径的关键酶,催化6-磷酸葡萄糖氧化为6-磷酸葡萄糖酸内酯,同时将NADP+还原为NADPH,供生物合成及维持细胞内的还原状态用。因此6-磷酸葡萄糖脱氢酶活性的高低可以从一定程度上反映出生物体的生物合成和抗氧化能力。
G6PDH催化NADP+还原生成NADPH,在340nm下测定NADPH增加速率。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
“具体操作步骤详见“产品资料”附件”
注意事项:
1、实验时,样本在冰上放置,以免变性和失活。试剂一37℃水浴放置。
2、比色皿中反应液的温度必须保持37℃,取小烧杯一只装入一定量的37℃蒸馏水,将此烧杯放入37℃水浴锅中。在反应过程中把比色皿连同反应液放在此烧杯中。
3、最好两个人同时做此实验,一个人比色,一个人计时,以保证实验结果的准确性。
4、若样本测定初始值(0s)大于0.5而ΔA测定小于0.1,可将样本稀释后再行测定。
实验实例:
- 称取约0.1g脾,加入1mL提取液进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,之后按照测定步骤操作,测得计算ΔA测定管= A2测定-A1测定=1.234-0.479=0.755,ΔA空白管=A2空白-A1空白=0.034-0.022=0.012,按样本质量计算酶活得:
相关发表文献:
- Yang Y, Liu W, Li D, et al. Altered glycometabolism in zebrafish exposed to thifluzamide[J]. Chemosphere, 2017, 183: 89-96.
- Wu S, Wang H, Li Y, et al. Transcription factor YY1 promotes cell proliferation by directly activating the pentose phosphate pathway[J]. Cancer research, 2018, 78(16): 4549-4562.
- Fan X, Hou T, Jia J, et al. Discrepant dose responses of bisphenol A on oxidative stress and DNA *ation in grass carp ovary cells[J]. Chemosphere, 2020, 248: 126110.
- Anderson B M, Wise D J, Anderson C D. Azotobacter vinelandii glucose 6-phosphate dehydrogenase properties of NAD-and NADP-linked reactions[J]. Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Protein Structure and Molecular Enzymology, 1997, 1340(2): 268-276.
BC1110/BC1115 NADP磷酸酶(NADPase)活性检测试剂盒
BC0400/BC0405 胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)活性检测试剂盒
BC1120/BC1125 NADP苹果酸酶(NADP-ME)活性检测试剂盒
BC2100/BC2105 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGDH)活性检测试剂盒
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文献和实验| AuthorYulu Ran, Qingzhuoma Yang, Jie Zeng, Fazhi Li, Yu Cao, Qingrui Xu, Dairong Qiao, Hui Xu, Yi Cao | Publish_toBIORESOURCE TECHNOLOGY |
| IF11.4000 | PMID37390935 |
分病人经纠正酸中毒和抗感染等对症处理后病情缓解。 辅助检查 1.如G6PD酶活性减低明显,可以确诊者,检查框限以“A”为主; 2.对于G6PD酶活性减低不明显或筛选试验为中间值者,需进一步排除其他溶血性贫血,须检查框限“B”; 3.对有慢性溶血性贫血者,必须检查框限“B”,此外,尚需考虑到其他先天性非球形红细胞溶血性贫血(红细胞酶病); 4.对重型G6PD缺乏症患者,可推荐至专门实验室进行特需检查,鉴定变异型和基因分析,为以后开展产前诊断和优生优育工作做准备。 疗效
度。 (2) 吸收系数法 按各品种项下的方法配制供试品溶液,在规定的波长处测定其吸收度,再以该品种在规定条件下的吸收系数计算含量。用本法测定时,应注意仪器的校正和检定。 (3) 计算分光光度法 采用计算分光光度法应慎重。本法有多种,使用时均应按各品种项下规定的方法进行。当吸收度处在吸收曲线的陡然上升或下降的部位测定时,影响精度的因素较多,故对照品和供试品测试条件应尽可能一致。若测定时不用对照品,如维生素A测定法,则应在测定时对仪器作仔细的校正和检定。
蛋白的考马斯亮兰溶液连续进样6次,得到吸光度的相对标准偏差。表1 精密度测定结果 2.3 稳定性 取1mg/ml牛 血清 蛋白标准溶液每十分钟测定一次,50分钟内的吸光度变化如下表2。表2 稳定度测定结果 3. 结论该方法测定快速、简便,干扰物少,是目前灵敏度较高的蛋白质含量测定的紫外分光光度法。











