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甘油三酯(TG)含量检测试剂盒 可见分光光度法

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  • ¥600
  • Solarbio已认证
  • 北京
  • BC0620
  • 2025年07月14日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
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    • 保存条件

      2-8℃

    • 保质期

      6个月

    • 英文名

      Glycerin Trilaurate(TG)Content Assay Kit

    • 库存

      99

    • 供应商

      北京索莱宝科技有限公司

    • CAS号

      BC0620-50T/48S

    • 规格

      50管/48样


    甘油三酯(TG)含量检测试剂盒说明书
    可见分光光度法
    注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
    货号:BC0620
    规格:50T/48S
    产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
    试剂名称 规格 保存条件
    试剂一 自备试剂 -
    试剂二 液体7 mL×1瓶 2-8保存
    试剂三 液体20 mL×1瓶 2-8保存
    试剂四 液体10 mL×1瓶 2-8保存
    试剂五 液体20 mL×1瓶 2-8保存
    试剂六 液体20 mL×1瓶 2-8保存
    标准品 粉剂×1 2-8保存
    溶液的配制:
    1. 试剂一:自备玻璃空瓶,*和异丙醇按体积比1:1混合,盖紧后混匀,大约需要90mL,现用现配,2-8℃保存;
    2. 标准品:临用前加5 mL试剂一,即1mg/mL甘油三酯标准溶液,-20分装保存两周,避免反复冻融



    技术指标:
    最低检出限:0.0559 mg/mL
    线性范围:0.0625-1.2 mg/mL
    注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
    需自备的仪器和用品:
     可见分光光度计、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、水浴锅、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿、涡旋振荡仪、*、异丙醇、蒸馏水和100mL玻璃空瓶。
    操作步骤:
    • 样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
     
    1. 组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆,8000g4℃离心10min,取上清待测。
    2. 细胞、细菌:先收集500-1000万细胞或细菌到离心管内,离心弃上清,加1mL试剂一,超声波破碎1min功率200W,超声2s,停1s),8000g4℃离心10min,取上清待测。
    3. 血清(浆)等液体样本:直接测定。
    二、测定步骤
    1. 分光光度计预热30min,调节波长到420nm,蒸馏水调零。
    2. 水浴锅预热到65℃。
    试剂名称(μL 空白管 标准管 测定管
    标准液 - 200 -
    TG待测液 - - 200
    试剂一 825 625 625
    试剂二 125 125 125
    加试剂一后充分混匀,再加试剂二,剧烈振荡30s,静置3-5min后再剧烈震荡30s,如此反复3次,常温静置一定时间分层后取上层溶液75μL,置于新的EP管中。
    3.甘油三酯含量测定:
    试剂名称(μL 空白管 标准管 测定管
    上层溶液 75 75 75
    试剂三 250 250 250
    试剂四 75 75 75
    充分混匀,65℃水浴3min,冷却
    试剂五 250 250 250
    试剂六 250 250 250
    充分混匀,65℃水浴15min,冷却
    取出EP管,待冷却后,吸取全部反应液至玻璃比色皿中,于420nm 处比色,记为A空,A标和A测。(空白管和标准管需检测1-2次。)
    、TG计算公式:
    1. 血清(浆)中甘油三酯含量:
    TG含量(mg/dL=C标准品×A-A空)÷A-A空)×100 =100×A-A空)÷A-A空)  
    2. 组织或细胞、细菌中甘油三酯含量:
    (1) 按样本蛋白浓度计算
    TG含量(mg/mg prot= C标准品×V×A-A空)÷A-A空)÷Cpr ×V
    =(A-A空)÷A-A空)÷ Cpr
    (2) 按样本质量计算
    TG含量(mg/g质量)= C标准品×V×A-A空)÷A-A空)÷W=A-A空)÷A-A空)÷ W
    (3) 按细胞/细菌数量计算: 

    TG含量(mg/104 cell)= C标准品×A-A空)÷A-A空)×V÷N
    =(A-A空)÷A-A空)÷N
    C标准品:标准品浓度,1mg/mL100:单位换算系数,1dL=100mLCpr:样本蛋白浓度,mg/mLW:样本质量,gV:加入试剂一的体积,1mLN细菌或细胞数量,以万计
    注意事项:
    1. 试剂盒中有易挥发性物质,实验过程中需佩戴手套和口罩,试剂瓶盖打开后应该及时盖紧。
    2. 加试剂二后需反复剧烈振荡,使待测液中甘油三酯得到充分提取,振荡幅度、时间、反复次数以及等待分层时间均应保证一致。
    3. 为保证试验的重复性,每次水浴后的冷却时间要统一。
    4. 若测定管OD值大于1时,建议将样本用试剂一适当稀释后再进行检测,并在计算时需乘以相应的稀释倍数。
    相关发表文献:
    1. Wei Hu,Rui Wei,Liyue Wang,et al. Correlations of MMP-1, MMP-3,and MMP-12 with the degree of atherosclerosis, plaque stability and cardiovascular and cerebrovascular events. Experimental and Therapeutic Medicine. 2018;(IF1.448)
    2. Jieyong Xing,Yanshao Liu,Tao Chen. Correlations of chemokine CXCL16 and TNF-α with coronary atherosclerotic heart disease. Experimental and Therapeutic Medicine. November 2017;(IF1.448)
    3. Zhenbin Xu,Xizhuang Bai. Strontium ranelate-induced anti-adipocytic effects are involved in negative regulation of autophagy in rat bone marrow mesenchymal stem cells. International Orthopaedics. October 2018;(IF2.384)
    4. Chu X Y, Yang S Z, Zhu M Q, et al. Isorhapontigenin Improves Diabetes in Mice via Regulating the Activity and Stability of PPARγ in Adipocytes[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2020, 68(13): 3976-3985.
    5. Li W, Li Y, Zhao Y, et al. The protective effects of aloperine against ox-LDL-induced endothelial dysfunction and inflammation in HUVECs[J]. Artificial Cells, Nanomedicine, and Biotechnology, 2020, 48(1): 107-115.
    参考文献:
    1. Fletcher M J. A colorimetric method for estimating serum triglycerides[J]. Clinica Chimica Acta, 1968, 22(3): 393-397.
    2. Hercules D M, Sheehan T L. Chemiluminescent determination of serum glycerol and triglycerides[J]. Analytical chemistry, 1978, 50(1): 22-25.
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