- ￥1300
- Solarbio
- 北京
- BC2295
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2-8℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Neutral Proteinase(NP) Activity Assay Kit
- 库存：
99
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号：
BC2295-100T/48S
- 规格：
100管/48样
中性蛋白酶（NP）活性检测试剂盒说明书
微量法
货号：BC2295
规格：100T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体55mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂三 | 液体20mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂四 | 液体4mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 标准品 | 液体1mL×1支 | 2-8℃保存 |
- 试剂一：临用前加入4mL蒸馏水，充分溶解。
- 试剂二：临用前加入4mL 提取液，沸水浴中搅拌溶解。
- 标准品：20μmol/mL标准酪氨酸。
NP在一定的温度和中性pH条件下，催化水解蛋白质。由于其安全无毒、水解能力强、作用范围广等特点，中性蛋白酶常用于食品、饲料、化妆品和营养保健品生产。中性条件下，NP催化酪蛋白水解产生酪氨酸；在碱性条件下，酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝；在680nm有特征吸收峰。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
研钵/匀浆器、台式离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、1.5 mL EP管、冰和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
称约0.1g组织，加入1mL提取液，冰上充分研磨，10000rpm 4℃离心10min，取上清，即粗酶液，置冰上待测。或直接称取0.1g酶制品，加入1mL提取液，置冰上待测。
二、测定步骤
- 分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至680nm，蒸馏水调零。
- 试剂一、试剂二和试剂三置于30℃水浴保温30min以上。
- 标准溶液的配制：临用前将20μmol/mL标准液用蒸馏水稀释80倍至0.25μmol/mL标准溶液使用，现用现配。
- 样本测定 (1.5mLEP管中分别加入下列试剂) ：
| 试剂名称（µL） | 对照管 | 测定管 | 空白管 | 标准管 |
| 粗酶液 | 20 | 20 | - | - |
| 试剂一 | 40 | - | ||
| 试剂二 | - | 40 | ||
| 混匀后30℃水浴保温10min | ||||
| 试剂一 | - | 40 | ||
| 试剂二 | 40 | - | ||
| 混匀后10000rpm 4℃离心10min，取上清 | ||||
| 上清 | 40 | 40 | - | - |
| 蒸馏水 | - | - | 40 | - |
| 标准品 | - | - | - | 40 |
| 试剂三 | 200 | 200 | 200 | 200 |
| 试剂四 | 40 | 40 | 40 | 40 |
| 混匀后30℃水浴保温20min。取200μL于微量玻璃比色皿/96孔板，于680nm测定光吸收，分别记为A对照管、A测定管、A空白管、A标准管。并计算ΔA测定=A测定管-A对照管、ΔA标准=A标准管-A空白管。 | ||||
注意事项：
若反应较弱，（A测定管-A对照管）差值较小，可适当延长反应时间（20-30min），即第一步水浴时间，最后计算酶活时对公式进行修改。
实验实例：
- 取0.1g兔脾脏加入1mL提取液冰上充分研磨，10000rpm 4℃离心10min，取上清，即粗酶液，置冰上，之后照测定步骤操作，用96孔板测得计算ΔA测定=A测定管-A对照管=0.132-0.123=0.009，ΔA标准=A标准管-A空白管=0.259-0.045=0.214。按样本质量计算酶活得：
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BC2280/BC2285 酸性蛋白酶（ACP）活性检测试剂盒
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文献和实验Ecotoxicological Evaluation of Earthworm (Eisenia fetida) Induced by Enrofloxacin and Di-(2-Ethylhexyl) Phthalate点击查看
| AuthorJianpeng Gao, Qinghong Sun, Yuan-Liang Liu, Wei-Jie Xiong, Si-Han Zeng, Yulong Zhang, Yongtao Li, Hui-Juan Xu | Publish_toAgronomy-Basel |
| IF3.7000 | PMID |
（一）检测原理 血细胞比容（Hct、Ht、HCT或PCV）是指在一定条件下，经离心沉淀压紧的红细胞在全血样本中所占比值。 1、离心法：包括温氏法（Wintrobe法）、微量法：是将抗凝血置于孔径统一的温氏管或毛细玻管中，以一定转速离心一定时间后，计算红细胞层占全血的体积比。 2、血液分析仪法：原理是当细胞通过计数小孔时，形成相应大小的脉冲，脉冲的多少即为细胞数量，脉冲高度为细胞体积，通过红细胞平均体积（MCV）和红细胞计数（RBC）即求得血细胞比容，Hct=MCV×RBC
一致。三、间接凝集的分类 1、根据载体的不同，可分为间接炭凝、间接乳胶凝集和间接血凝等。2、根据吸附物不同可分为间接凝集反应（吸附抗原）和反向间接凝集反应（吸附抗体）。3、根据反应目的不同，又可分为间接凝集抑制反应和反向间接凝集抑制反应。4、根据用量和器材的不同又可分为试管法（全量法）、凹窝板法（半微量法）和反应板法（微量法）。
1、手工法：有折射计法、粘度法、比密测定法、离心法和放射性核素法。温氏法：采用中速离心，不能完全排除红细胞间残留血浆，测定结果偏高，已属淘汰。微量法：采用高速离心，细胞间残留血浆比温氏法少（约2%），且样本用量小、操作简便、残留血浆1%～3%。 2、血液分析仪法：仪器法CV为1%，手工法CV为2%，仪器法应注意红细胞增多症或血浆渗透压异常时会出现误差。
