- ￥300
- Solarbio
- 北京
- BC0460
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2-8℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Soil Neutral Phosphatase(S-NP) Activity Assay Kit
- 库存：
99
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号：
BC0460-50T/48S
- 规格：
50管/48样
土壤中性磷酸酶（S-NP）活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC0460
规格：50T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 试剂一 | 液体21 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂三 | 液体11 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂四 | 粉剂×2支 | 2-8℃保存 |
| 标准品 | 液体1 mL×1支 | 2-8℃保存 |
- 试剂二：临用前加入50mL蒸馏水充分溶解，2-8℃保存8周；
- 试剂四：临用前取1支加入576μL无水乙醇（自备），24μL蒸馏水充分溶解。试剂变褐色后不能再使用，2-8℃可保存2周；
- 标准品：0.5μmol/mL苯酚标准液。
土壤磷酸酶是一类催化土壤有机磷矿化的酶，其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性，是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH显著影响，根据最适pH范围，通常分为酸性、中性和碱性三种类型。
中性环境中，S-NP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚和磷酸氢二钠，通过测定酚的生成量即可计算出S-NP活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、台式离心机、37℃恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、研钵、冰、蒸馏水、乙醇、30~50目筛和甲苯（不允许快递）。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比可以例参考文献）
1. 新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30~50目筛。
2．称取风干混匀土壤约0.1g，加入0.05mL甲苯（自备），轻摇15min；然后再加入0.4mL试剂一并且充分摇匀，置于37℃恒温培养箱，开始计时，催化反应24h；到时后取出并迅速加入1mL试剂二，充分混匀，以终止酶催化的反应。10000rpm，25℃离心10min，取上清液置于冰上待测。
二、测定步骤
- 分光光度计预热30min以上，调节波长到660nm，蒸馏水调零。
- 空白管：取1mL玻璃比色皿，依次加入50μL试剂一，200μL试剂三，20μL试剂四，充分混匀，显色后再加730μL蒸馏水，混匀后室温静置30min，于660nm测定吸光度，记为A空白管。
- 标准管：取1mL玻璃比色皿，依次加入50μL标准液，200μL试剂三，20μL试剂四，充分混匀，显色后再加730μL蒸馏水，混匀后室温静置30min，于660nm测定吸光度，记为A标准管。
- 测定管：取1mL玻璃比色皿，依次加入50μL上清液，200μL试剂三，20μL试剂四，充分混匀，显色后再加730μL蒸馏水，混匀后室温静置30min，于660nm测定吸光度，记为A测定管。
活性单位定义：37℃中每克土壤每天释放1nmol酚为1个酶活单位。
S-NP活性（U/g 土样）=[C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)] ×1000×V总÷W÷T
=725×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷W
C标准液：0.5μmol/mL；V总：催化体系总体积，1.45mL；W：土壤样本质量，g；T：催化反应时间，24h=1d；1000：单位换算系数，1μmol=1000nmol。
注意事项：
测定期间请将样本在冰上放置，以免酶变性或失活。
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文献和实验Broomcorn millet (Panicum miliaceum L.) tolerates soil salinity by regulating salt-tolerance mechanism and reshaping rhizosphere microorganisms点击查看
| AuthorYuan Yuhao, Li Jiang, Zhang Miaomiao, Yang Qinghua, Feng Baili | Publish_toPLANT AND SOIL |
| IF4.9000 | PMID |
h，离心沉淀后，加入细胞裂解液（1% NP40，20mmol/L EDTA pH8.0，50mmol/L Tris-cl pH7.5），离心取上清加入10%SDS、蛋白酶K，50℃孵育2h，再加入RNase A室温放置1h。酚、氯仿抽提，取10μl DNA， 70℃放5min后，15ｇ/Ｌ琼脂糖凝胶，4V/cm电泳3h，观察结果并照像保存。 一、反复冻融法： 1、将细胞在-20度以下冰冻，室温融解，反复几次，由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀，使细胞结构破碎。
自己需要的实验处理，处理结束后开始收蛋白，先用 1×PBS 将细胞洗两次，每次吸尽上清。2、每孔加入 200ul NETN 裂解液，冰上裂解 15min High salt NETN buffer母液配制 100ML20mM Tris,PH=8.01M2ml500mM NACL5M10ml0.5% NP-4020%2.5ml1mM EDTA0.5M200ulH2O85.3ML临用前加蛋白酶抑制剂3、用细胞刮刮细胞，将细胞收集于 1.5mlEP 管中，1500g,4℃，离心 10min4、离心
相关专题 主要包括以下 4 个基本步骤：样品制备；电泳分离；蛋白的膜转移；免疫 杂交与显色――蛋白检测。 溶液和试剂 1. 1X 磷酸盐缓冲液(PBS ) 2. ModifiedRIPAbuffer：Tris-HCl:50 mM, pH 7.4； NP-40: 1%；Na-deoxycholate: 0.25%；NaCl: 150 mM；EDTA :1 mM；PMSF: 1 mM
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