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- 文献和实验
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- 保存条件:
避免反复冻融。2-8°C不超过一个月,-80°C不超过3635个月
- 规格:
50ug/100ug
- 物种Homo sapiens (Human,人) 相同的名称,不同的物种。
- 来源原核表达
- 宿主E.coli
- 内毒素水平<1.0EU/µg(LAL法测定)
- 亚细胞定位细胞膜
- 预测分子量62.5kDa
- 实际分子量63kDa(差异分析请参阅说明书)
- 片段与标签Pro31~Ala555 with N-terminal His Tag
- 缓冲液成份20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
- 性状冻干粉
- 纯度> 80%
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文献和实验1D4系统的最大优势在于抗体与抗原相互作用的高度特异性。表位序列和链长对结合至关重要。例如,将第三位丙氨酸替换成甘氨酸,即移去一个甲基基团,抗体将不再与表位结合。同样,完整的九个氨基酸标签会与Rho1D4抗体结合紧密,去除两个氨基酸则阻断结合。因此,含有与Rho1D4表位相似序列的蛋白引起的非特异性结合被最小化,因此回收蛋白的纯度非常高。(见表1) 3,4,5,6,7,8高回收量而Rho1D4系统的另一个优势是洗脱目标蛋白的高回收率。包括细菌,酵母和哺乳动物细胞系在内的表达系统已经针对特定的GPCR
等以亚胺络合物的形式键合到因定相上,由于这些金属离子与色氨酸、组氨酸和半胱氨酸之间形成了配价键,从而形成了亚胺金属—蛋白螯合物,使含有这些氨基酸的蛋白被这种金属螯合亲和色谱的固定相吸附。螯合物的稳定性受单个组氨酸和半胱氨酸解离常数所控制,从而亦受流动相的pH和温度的影响,控制条件可以使不同蛋白质相互分离。(2)小配体亲和介质配体有精氨酸、苯甲酰胺、钙调因子、明胶、肝素和赖氨酸等等。(3)抗体亲和介质即免疫亲和层析,配体有重组蛋白A和重组蛋白G,但蛋白A比蛋白G专一,蛋白G能结合更多不同源的IgG
如何选择凝胶 生物分子下游纯化的对象一般包括蛋白、酶、重组蛋白、单抗、抗体及抗原、肽类、病毒、核酸等。纯化前首先需要测定生物分子的各物理和化学特性,然后通过实验选择出最有效的纯化流程。 1.测定------分子量、PI 当目标蛋白的物理特性如分子量、PI等都不清楚时,可用PAGE电泳方法或层析方法加以测定。分离范围广阔的Superose HR预装柱很适合测定未知蛋白的分子量。用少量离子交换介质在多个含不同PH缓冲液的试管中,可简易地测出PI,并选择纯化用缓冲液的最佳PH
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