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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
避免反复冻融。2-8°C不超过一个月,-80°C不超过2634个月
- 规格:
50ug/100ug
- 物种Homo sapiens (Human,人) 相同的名称,不同的物种。
- 来源原核表达
- 宿主E.coli
- 内毒素水平<1.0EU/µg(LAL法测定)
- 亚细胞定位n/a
- 预测分子量34.6kDa
- 实际分子量-(差异分析请参阅说明书)
- 片段与标签Ser43~Ala314 with N-terminal His Tag
- 缓冲液成份磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
- 性状冻干粉
- 纯度> 95%
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文献和实验基因沉默的时效性和遗漏,尤其在多基因家族中的非特异性问题尚未得到解决。 目前RNAi 机制尚未完全阐明,因此需要更加深入的研究。 还有 ZFNs技术和TALEN技术 ZFNs(锌指核糖核酸酶)是由一个DNA识别域和一个非特异性核酸内切酶构成。DNA 识别域是由3-6个Cys2-His2锌指蛋白(zinc-fingers)串联组成,每个锌指蛋白识别并结合一个特异的三联体碱基,形成α-β-β二级结构。其中α螺旋的16氨基酸残基决定锌
的稳定性 mRNA的快速降解势必影响蛋白质的产生。因此在这一部分重点阐述决定mRNA稳定性的因素,这将在E.coli高效表达外源基因中有实际应用。在E.coli中有多种不同的RNase参与mRNA的降解,其中包括内切核酸酶(RNase E,RNase K和RNase III)和3’外切核酸酶(RNase II和多聚核苷酸磷酸化酶[PNPase]),目前尚未在原核细胞中发现5’外切核酸酶[110]。mRNA的降解并非由非特异性的外切核酸酶随机剪切而引起,因为在mRNA的长度和半衰期之间并没有反向
4 %SDS 0.2 % 溴酚蓝 20 % 甘油 三、实验方案 1、外源基因的诱导表达 (1 )用适当的限制性内切核酸酶消化载体DNA 和目的基因。 (2 )按连接步骤连接目的基因和载体,并转化到相应的宿主菌。 (3 )筛选出含重组子的转化菌落,提取质粒DNA 作限制性内切核酸酶图谱,DNA 序列测定, 确定无误后进行下一步。 (4 )如果表达载体的原核启动子为PL 启动子,则在30 -32 ℃ 培养数小时,使培养液的OD600达0.4-0.6 ,迅速使温度升至42 ℃ 继续
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