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- 百奥莱博
- QN1221-FCA
- 北京
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
76
- 英文名：
SABC(Mouse/Rabbit IgG)-FITC Kit
- 保质期：
一周
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
阴凉干燥
- 规格：
100T-200T
特别提示：包括SABC免疫组化试剂盒(小鼠/兔IgG)(FITC)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：SABC免疫组化试剂盒(小鼠/兔IgG)(FITC)
英文名称：SABC(Mouse/Rabbit IgG)-FITC Kit
产品货号：QN1221
产品规格：100T-200T
本试剂盒适合于一抗为小鼠或者兔IgG来源的免疫组化实验，FITC荧光检测。
SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的，用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质，同亲和素一样，对生物素有极高的亲和力，亲和素是一个碱性蛋白质(IP=10)，经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性，对组织和细胞的非特异吸附很低，基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex，SABC大约可形成一百个左右的FITC和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的FITC将保证SABC具有很高的敏感性。
试剂盒组分：
封闭液(5% BSA)———————————10ml
Bio-羊抗小鼠/兔IgG浓缩液——————100ul
SABC-FITC浓缩液-——————————100ul
稀释液———————————————30ml
抗荧光衰减封片剂——————————10ml
操作步骤：以石蜡切片热修复为例
1. 切片常规脱蜡至水。
2. 可选步聚：
a、热修复抗原，将切片浸入0.01M 柠檬酸钠缓冲液(PH6.0),电炉或微波炉加热至沸腾后断电，间隔5-10分钟后，反复1-2次。冷却后PBS(pH7.2-7.4)洗涤1-2次。
b、酶消化，滴加消化液，37℃10分钟，PBS(pH7.2-7.4)洗涤2-3次。
c、跳过此步，直接进入下一步。
3. 滴加5% BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 免洗。
4. 用稀释液将一抗按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周)，也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗，37℃ 孵育1小时左右或20℃ 2小时左右，也可4℃过夜。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次，每次2分钟(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说，阳性染色强度不够时，可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时，可降低一抗浓度和缩短孵育时间)。
5. 根据使用量,用稀释液将Bio-羊抗小鼠/兔IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul Bio-羊抗小鼠/兔IgG浓缩液,混匀即成工作液，此工作液4℃可保存一周)。滴加Bio-羊抗小鼠/兔IgG工作液，20-37℃孵育30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次，每次2分钟。
6. 根据使用量,用稀释液将SABC-FITC浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-FITC浓缩液，混匀即成SABC-FITC工作液，此工作液4℃可保存一周)。滴加SABC-FITC工作液，20-37℃孵育30分钟(避光)。PBS(pH7.2-7.4)洗涤4次，每次5分钟。
7. 滴加抗荧光衰减封片剂封片。荧光显微镜观察。
对于细胞爬片，固定后，PBS漂洗两次，再用0.5% Trxiton X-100室温孵育20分钟， PBS漂洗两次，接上述第3步。
对于冰冻切片，固定后，PBS漂洗两次，再接上述第2步。
注意事项：
如果背景过高，在SABC反应之后，用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次，PBS洗2次，然后封片观察。
我公司销售的SABC免疫组化试剂盒(小鼠/兔IgG)(FITC)质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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性免疫球蛋白产生交叉反应， 例如：检测小鼠样本蛋白，则不应选择小鼠或大鼠源的一抗，最好选兔源的一抗，则二抗则可选择偶联了检测分子（酶、荧光素、生物素等）的抗兔IgG。如果选择有偶联物的一抗则不适用上述情况，除免疫组化外的其它对不含内源性免疫球蛋白样本的检测方法，则抗体宿主物种的影响不大，如对不含IgG 的细胞裂解物样本的western blotting检测。 尽管如此，含有血清的组织裂解物和组织培养上清中含有免疫球蛋白，还原变性样本中含IgG，在western blot 检测中则结合
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