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- 百奥莱博
- HR0267-HCY
- 北京
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
261
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
裂解液RT保存；抑制剂-20℃
- 规格：
50ml/100ml
特别提示：包括SDS裂解液在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：SDS裂解液
产品货号：HR0267
产品规格：50ml/100ml
SDS裂解液采用优质原料配制，对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强裂解作用，是经典常用的细胞组织快速裂解液。SDS裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等下游实验。
SDS裂解液中已含常用磷酸酶抑制剂。
储存条件：裂解液室温保存；抑制剂-20℃保存。
有效期：一年。
注意事项：
● 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。
● 整个过程须保持样品处于低温状态。
●本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● zuì好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
使用方法：
A．细胞裂解
1．裂解液制备：每1ml冷的SDS裂解液中加入4μl蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2．取5-10×106个细胞，在4℃，1000rpm条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
3．用冷 PBS 洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
4．每 5×106个细胞中加入500μl冷的裂解液(每106个细胞加100μl SDS裂解液。大约相当于6孔板的每孔加入100μl～150μl，或一个75 cm2培养瓶加1～2 ml。裂解液和细胞应充分接触。如果SDS裂解液不足量，细胞裂解效率
将会降低)，混匀后，在4℃条件下振荡15-20分钟。
5.在 4℃，14000rpm条件下离心15分钟。
6．快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，用于下游实验。
B．组织裂解
1．裂解液制备：每 1ml冷的SDS裂解液加入4μl蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2．取100mg组织样本剪碎，加入1ml裂解液，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。
3．将组织匀浆吸入另一预冷的干净离心管中，在4℃，10000rpm条件下离心5分钟。
4．将上清吸入另一预冷的干净离心管，用于下游实验。
上述蛋白提取物可分装后于-80℃冰箱保存备用。
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文献和实验在 argarose 的 beads 上，使之与含有抗原的溶液及抗体反应后，beads 上的 prorein A 就能吸附抗原达到精制的目的。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合；也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。 二、实验步骤 免疫共沉淀反应： 1. 转染后 24～48 h 可收获细胞，加入适量细胞裂解缓冲液（含蛋白酶抑制剂），冰上裂解 30 min，细胞裂解液于 4 °C，最大转速离心 30 min 后取上清。 2. 取少量裂解液以备 Western blot 分析，剩余裂解液加
。 3. 推荐优选柱式法进行蛋白样品提取 解决蛋白样品粘稠的最佳方式是改变蛋白质的制备方式，可以选择新一代柱式蛋白提取法替代传统的裂解液法。柱式法通过使用优化的裂解液配方，可有效提高裂解液对样品的裂解效率，特别是可以提升难溶蛋白的溶解效率。同时配合使用离心管柱技术有效阻截核酸，让蛋白溶液瞬间澄清无粘稠物产生，无需复杂操作，即可获得高质量无丢失的蛋白样品。 测试实例：裂解液法 VS 柱式法 同种样品分别使用裂解液法和柱式法进行 WB 样品制备，SDS-PAGE 电泳后考染如图
原理 免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是利用抗原和抗体的特异性结合以及 Protein A 或 G 特异性地结合到抗体的Fc 片段的现象探测两个蛋白分子间是否存在相互作用的一种方法。在细胞裂解液中加入针对蛋白M的抗体，孵育后再加入Protein A 或 G 预处理的 Sepharose 珠，若细胞中有与蛋白M结合的蛋白 N，就可以形成这样一种复合物：“蛋白 N-蛋白M—抗蛋白 M 抗体—Protein A 或 G—Sepharose 珠”，经 SDS
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