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B-PER 细菌总蛋白抽提试剂

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    Thermo Scientific B-PER细菌蛋白抽提试剂主要用于从细菌中抽提可溶性蛋白。使用这种基于试剂的裂解方法则无需使用超声破碎等刺耳的机械方法。这些简单易用的细胞裂解溶液采用温和的非离子型去垢剂来裂解细胞和溶解蛋白,不会引起蛋白变性。加入DNaseI和溶菌酶等酶可以提高难以纯化的大分子量蛋白的得率。B-PER*试剂与GST纯化和固定化的组氨酸标签金属亲和色谱(IMAC)等下游蛋白纯化方法也是相容的。纯化或者鉴定重组蛋白的第一步就是裂解细胞和释放蛋白。超声和其他细胞裂解方法的效率不如B-PER溶液,而自制裂解的溶液含有干扰下游应用的去垢剂和成分。B-PER裂解试剂有两种缓冲体系,分别是20 mM Tris缓冲液(pH 7.5)和磷酸盐缓冲液(产品货号 78266), 所得到的裂解物与电泳、亲和纯化、免疫沉淀、蛋白相互作用分析、交联和蛋白标记等经典的下游实验完全兼容。如果需要,也可以通过透析或者凝胶过滤(脱盐柱)去除温和的去垢剂成分。
    产品特点:
    • 即时可用 B-PER裂解试剂提供了使用温和的非离子型去垢剂(专利)一步裂解大肠杆菌的方法,并且有Tris或者磷酸缓冲盐液配方可供选择。
    • 简单、快速 – 仅需向细菌沉淀中加入B-PER裂解试剂并摇动10分钟。沉淀细胞碎片即可回收可溶性蛋白。
    • 得率极高 – 可以从细菌裂解物中回收可溶和不可溶的重组蛋白和纯化包涵体到接近均一水平。(溶解已纯化的包涵体和复性蛋白质,见22-23页)
    • 灵活 B-PER裂解试剂适用于任何规模的蛋白抽提。有含酶或不含酶的磷酸盐缓冲液、1X 和2X Tris缓冲液体系。
    • 相容性强 – 与蛋白酶抑制剂混合物完全兼容,所得的蛋白抽提物可用于蛋白质分析、亲和纯化 (例如,GST, 6xHis)和其他应用。
    • 方便即用的形式:
    B-PER和B-PER II (2X)试剂不含酶
    B-PER (磷酸盐缓冲液)试剂不含氨基,可以直接用于蛋白标记和交联。
    – 含酶的B-PER和B-PER Direct裂解试剂- -含有提高裂解和回收效率的溶菌酶和DNA酶

    Thermo Scientific B-PER裂解试剂选择指南
    B-PER裂解试剂
    用途
    B-PER
    • 细菌裂解
    • 亲和标签蛋白的纯化
    B-PER Ⅱ(2X浓缩液)
    • 低细胞密度的细菌裂
    • 解低表达水平蛋白的纯化
    B-PER(磷酸盐缓冲液)
    • 无氧基体系保证裂解物可以用于与氨基反应的蛋白标记和交联
    B-PER(含酶)
    • 通过增加对细胞膜和DNA的消化来提高产量
    • 高分子量蛋白质的回收
    • 从包涵体回收不溶性蛋白
    B-PER Direct(含酶)
    • 在培养基里直接裂解细菌
    • 96孔板样品筛选

    参考文献:
    Akifusa,S.,et al. (2005).Microbiology151,1395-1402.
    Fraillery, D.,et al. (2007).Clin. Vaccine Immunol.14, 1285-1295.
    Jing, W. and DeAngelis, P.L. (2000).Glycobiology10, 883-889.
    McClain,M.S. and Cover, T.L. (2007).Infect. Immun.75, 1785-1793.
    Montero, E.,et al. (2006).J. Biol. Chem.281, 35717-35726.
    Pai,S.,et al. (2005).Nucleic Acids Res.33, e162.
    Richard-Fogal, C.L.,et al. (2007).J. Bacteriol.189, 455-463.
    Young, V.B.,et al. (2004).Infect. Immun.72, 2521-2527.
    Yu, W.,et al.. (2005).J. Neurosci.25, 5573-5583.
    更多产品链接:http://www.thermo.com.cn/Product4579.html

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