- ¥2248
- APPLIED CELL
- AC-1001015
- 上海
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海埃泽思生物科技有限公司
- 规格：
500ml
产品基本信息
| 产品名称 | Applied Cell®人成纤维细胞无血清培养基 |
| 货 号 | AC-1001015 |
| 规 格 | 500mL |
| 运输保存条件 | 基础培养基2-8℃，添加剂-20--80℃ |
| 使用范围 | 人真皮/肺/心脏等多种组织器官来源成纤维细胞培养 |
| 保质期 | 12个月 |
产品简介
人成纤维细胞无血清培养基是埃泽思生物科技有限公司（Applied Cell®）自主研发的一款适用于人成纤维细胞培养的无动物源细胞培养产品。本产品应用人真皮、肺、心脏等多种组织器官来源成纤维细胞原代分离、扩增与传代培养，且不含动物血清，内毒素水平低于药典标准（<0.06EU/mL）。本产品生产过程遵循ISO9001体系,并符合GMP指导原则。产品特性
- 无外源动物蛋白成分，大大降低各类病毒、霉菌和支原体等的污染风险。
- 全程无血清生产，极大降低批次间差异。
- 可用于原代分离。
- 内毒素<0.06EU/ml，远低于中国药典水平。
| 组分 | 规格 | 数量 | 运输 |
| 人成纤维细胞基础培养基 | 450mL | 1瓶 | 冰袋 |
| 人成纤维细胞添加剂 | 50mL | 1瓶 | 干冰 |
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操作方法
人成纤维细胞培养基配制
1.3人成纤维细胞培养基可直接应用于人真皮、肺、心脏等多种组织器官来源的成纤维细胞的原代分离、扩增与传代培养。
操作方法(以下步骤皆应在无菌条件下操作)
人成纤维细胞复苏(10cm dish)
2.1 从液氮或-80℃冰箱中取出冻存的人成纤维细胞，迅速放入37℃水浴快速融解。
2.2 在生物安全柜或超净台中，将解冻后的细胞悬液缓慢加入5 mL预温的人成纤维细胞培养基（AC-1001015）。
2.3 1200rpm 离心3 min，吸掉上清，加入10ml人成纤维细胞培养基重悬细胞。
2.4 将细胞均匀铺到培养皿中，水平十字振动培养皿使细胞均匀分布，5% CO2的37℃恒温细胞培养箱中培养24小时后观察细胞状态。
2.5 24h后更换新鲜人成纤维细胞培养基继续培养，每2-3天更换培养液。
人成纤维细胞传代培养
1. 在显微镜下观察细胞，当细胞融合度达到90%，即可传代。
2. 在超净台/安全柜中，吸掉原有培养基，加入PBS溶液清洗一次，加入细胞消化液（AC-1001024/1001025）使之完全覆盖皿/瓶底。
3. 室温孵育4-5分钟或37℃孵育2-4分钟，显微镜下观察大部分细胞脱离皿底即停止消化。
4. 加入消化液2倍体积的人成纤维细胞培养基，用移液器轻轻吹打瓶壁上未完全脱离的细胞，并轻轻吹打混匀，使细胞完全分散。
5. 将细胞悬液转移到15 mL离心管中，1200 rpm离心3 min。
6. 弃上清，加入人成纤维细胞培养基，重悬细胞，计数。1：2-1：4比例传代，或按2-5x104 cells/cm2 传代，均匀铺在培养皿/瓶中，置于37℃，5%CO2 培养箱中培养。
注意：人成纤维增殖情况与细胞密度密切相关，所以传代时细胞密度不宜过稀。
人成纤维细胞冻存
1. 细胞达到90%汇合度， 吸掉原有培养基，PBS清洗一次。
2. 加入细胞消化液（AC-1001024/1001025）使之完全覆盖皿/瓶底，室温孵育4-5min或37℃孵育2-4min分钟，显微镜下观察大部分细胞脱离皿底即停止消化。
3. 加入消化液2倍体积的人成纤维细胞培养基，用移液枪轻轻吹打瓶壁上未完全脱离的细胞，并轻轻吹打混匀，使细胞完全分散。
4. 将细胞悬液转移到15 mL离心管中，1000 rpm离心3 min，吸掉上清。
5. 加入适量无血清细胞冻存液（治疗级）（AC-1001006），调整细胞冻存密度在1×106 cells/mL左右，每支冻存管分装1.5-2ml。
6. 直接放入-80℃，24h后转入液氮中长期保存。
质量控制
| 检验项目 Test Catagories |
参考数据 Reference Data |
结果 The results |
| 外观 Physical APPearance |
橙红色液体 Orange-red liquid |
符合规定 Conform to the provisions |
| 澄清度 Clarity |
澄清 Clear |
符合规定 Conform to the provisions |
| pH值 Ph value |
6.9-7.3 | 符合规定 Conform to the provisions |
| 渗透压 Osmolality |
270-340 （mosm/KgH2O） |
符合规定 Conform to the provisions |
| 细菌内毒素 Endotoxin |
小于0.06 EU/ml | 符合规定 Conform to the provisions |
| 无菌 Sterility |
无菌 Sterility |
符合规定 Conform to the provisions |
| 支原体 Mycoplasma |
0.11um过滤，支原体试验为阴性 The mycoplasma test was negative after 0.11um filtration |
符合规定 Conform to the provisions |
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无血清培养基(serum free medium,SFM):是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。但是它们可能包含个别蛋白或大量蛋白组分。虽然基础培养基加少量血清所配制的完全培养基可以满足大部分细胞培养的要求，但对有些实验却不适合，如观察一种生长因子对某种细胞的作用，这时需要排除其他生长因子的干扰作用。而血清中可能含有各种生长因子；又如需要测定某种细胞在培养过程中分泌某种物质（抗体、生长因子）的能力；或者要大规模的培养某种细胞，以获得它们的分泌产物。因此研制出无血清培养基
无血清培养基(serum free medium, SFM)：是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。简单地认为是体外细胞培养过程中的细胞培养基中不含有动物或人的血清，称为无血清细胞培养基。无血清培养基的基本配方是基本成分为基础培养基及添加组分两大部分。大多数的无血清培养基含有必须的向细胞内转运离子的转铁蛋白和调节葡萄糖摄取量的胰岛素，以及一些蛋白质如纤连蛋白、球蛋白、细胞生长因子等。无血清培养基被广泛的应用于培养哺乳动物和无脊动物细胞以制备单克隆抗体、病毒抗原、重组
