5,6-Dihydropyridin-2(1H)-one(H

北京大学陈英玉：细胞凋亡检测方法

方法 　　1 悬浮细胞的染色：将正常培养和诱导凋亡的悬浮细胞（0.5~1×106）用PBS洗2次，加入100ul Binding Buffer和FITC标记的Annexin-V（20ug/ml）10ul，室温避光30min，再加入PI（50ug/ml）5ul，避光反应5min后，加入400ul Binding Buffer，立即用FACScan进行流式细胞术定量检测（一般不超过1h）， 同时以不加AnnexinV-FITC及PI的一管作为阴性对照。 　　2 贴壁

Neuron：解密睡眠的新工具来了！北大李毓龙实验室开发新型组胺 GRAB 探针

等重要行为，但其分子调控机制仍是未解之谜。为此，人们亟需发展灵敏、特异的工具用于高时空分辨率监测组胺动态变化。 2023 年 3 月 15 日，北京大学李毓龙实验室在 Neuron 杂志在线发表研究论文，报道了一种新型基因编码的组胺探针 GRABHA 的开发，并结合这一新工具深入探究了睡眠觉醒过程中组胺的动态调控。 李毓龙实验室长期致力于系统性发展神经化学分子检测技术，先后开发了针对乙酰胆碱、多巴胺、去甲肾上腺素、五羟色胺、嘌呤类、脂类和多肽类神经递质/调质的荧光探针，此次发表的 GRABHA

钙成像、电压成像及神经递质探针原理介绍

。北京大学李毓龙团队利用可与神经递质相结合的G蛋白偶联受体作为探针的骨架，将荧光蛋白（cpEGFP）与特异性的人源神经递质受体巧妙地进行分子水平的融合和改造，成功开发出新型可遗传编码的一系列神经递质荧光探针。1）神经递质荧光探针原理这一系列神经递质探针原理类似，都是基于人源神经递质受体，其原理在于把cpEGFP嵌入特定的神经递质受体，受体与神经递质结合后会引发受体构象改变转换为荧光信号（图10）。目前通过病毒注射、转染等技术手段，可以将这种可遗传编码的探针表达在细胞或小鼠脑部，借助成像技术，观察神经