琼脂糖凝胶4B

特别提示：包括琼脂糖凝胶4B在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：琼脂糖凝胶4B
英文名称：Sepharose 4B
产品货号：GH1039
产品规格：100ml/200ml

本制品为传统的琼脂糖凝胶介质，是用4%浓度琼脂糖制备成的球型颗粒。非特异性吸附低，回收率高，可多次重复使用。可用于分子量差异大、对分辨率要求不高的样品的凝胶层析纯化。

琼脂糖凝胶(Sepharose)是目前生化专用分离介质中的主流产品，具有通透性高，可进行高流速操作，当工作液的离子强度以及PH值发生变化时，床体积没有明显变化；在高流速下有优良的分辨率。可以在pH3-13的苛刻的条件下工作，不需要反复地重新装柱，适用于工业规模生产，可以在位清洗等特点。琼脂糖凝胶主要用于分子量差异大、对分辨率要求不高的样品的凝胶色谱纯化。蛋白、大分子复合物、超螺旋DNA、病毒、多糖的分离纯化。

保存条件：室温或4℃保存，避免冰冻。

除了琼脂糖凝胶4B，我公司还供应以下相关产品：



名称：氯化717阴离子交换树脂
货号：QN4048
规格：500g

名称：DEAE纤维素DE-52
货号：QN4057
规格：100g
DEAE纤维素DE-52常用作柱色谱用吸附剂，分离提纯蛋白质、核酸、低相对分子质量蛋白质、酶、细胞碎片和细胞。
储存条件：室温干燥保存

名称：苯甲脒-琼脂糖凝胶4FF
货号：QN4062
规格：25ml
储存条件：4℃
外观：颗粒

名称：Q-琼脂糖凝胶FF
货号：QN4087
规格：100ml
本产品具有高化学稳定性、高流速、高载量、好的机械性能、可在位清洗、多次重复使用等特点，非特异性吸附低，回收率高，适用于工业规模生产，适用于在pH工作范围内可形成负离子的生物大分子的分离纯化，广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。

Q-琼脂糖凝胶FF是将三*胺基烷基季铵基团键合在高流速琼脂糖微球上形成的一种强阴离子交换介质。广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。本品为白色球状凝胶，无嗅、无味、无肉眼可见杂质。

亲和填料特性：
离子交换基团：-CH₂N⁺(CH₃)₃
离子交换类型：强阴离子，可交换离子Cl^-
基质：6%交联琼脂糖
蛋白质吸附容量：120mg HSA/ml介质
总离子交换量：0.18～0.25mmol/ml介质
形状：球形
粒径：45～165μm
流速：400～700cm/h(检测条件：层析柱10mm×300mm，柱床高15cm，25℃，流动相为0.1mol/L NaCl)
工作温度：4～40℃
耐热：pH7水中120℃，30min
耐压：0.3MPa
pH值稳定性：1～14(短时间，在位清洗)；2～12(长时间)
pH工作范围：2～12
化学稳定性：所有常用的水相缓冲液(1mol/L氢*化钠；8mol/L尿素；6mol/L盐酸胍；70%乙醇；)
储存条件：4～25℃，有效期5年。

操作说明：
1．装柱
① 让所有的材料和试剂达到室温。配制初始缓冲液（平衡液）和洗脱缓冲液。
② 根据柱子大小取所需量的凝胶，清洗掉20%乙醇，抽干，用初始缓冲液（按凝胶:缓冲液=3:1的比例）配成匀浆。
③ 将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位（液面略高于滤膜），务必使底端无气泡。
④ 用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内，注意勿使产生气泡。打开柱子出液口，使凝胶在柱内自由沉降，连结好柱子顶端柱头。
⑤ 打开蠕动泵，让缓冲液用使用时流速的1.33倍的流速流过，使柱床稳定。用2～3倍柱体积的缓冲液平衡柱子。
2．平衡
让平衡缓冲液以一定流速流过柱子，到流出液电导和pH不变。平衡液是低浓度的缓冲溶液，如Tris、PBS等。
3．上样
① 样品用平衡液配制，浑浊的样品要离心和过滤后上样。盐浓度太大的样品处理后再配。
② 一般情况是让目标产品结合在柱子上，用平衡液洗去杂质，再选择一种洗脱液洗下目标产品。
③ 介质对样品组分吸附的程度取决于样品的带电性质、流动相的离子强度和pH值。盐浓度小，介质对样品组分吸附较牢。用DEAE介质时，推荐的pH值是小于目标产品等电点1个单位。
4．洗脱
Q琼脂糖凝胶FF介质可用增大盐浓度或减小pH值进行洗脱，常用增大盐浓度的办法洗脱。
5．再生
  一般用高盐浓度的缓冲液（含1～2mol/L NaCl）洗或减小pH洗10倍以上柱体积，接着用结合蛋白的平衡液洗到平衡，可再次使用。
  若有失活蛋白质或脂类物质在再生时洗不掉，可用在位清洗（CIP）除去。
6．在位清洗
① 对于以离子键结合上去的蛋白，可以用2M NaCl去除。
② 对沉淀蛋白、对以疏水性结合的蛋白或脂类，可用1M NaOH去除。
③ 对强疏水性结合的蛋白、脂类等，用4~10倍柱体积的70%乙醇或30%异bǐng醇清洗，但要注意有机溶剂的浓度以梯度的方式逐渐增加，否则容易产生气泡。
  清洗完毕后，用至少3倍缓冲液平衡柱子。
7．注意
  在装柱、使用和保存柱子的时候，要避免柱子流干，气泡进入。
  在使用过程中，不能使用强酸，如使用酸洗，应使用浓度低于0.1M的冰*酸。
8．去热源
  用0.5M的氢*化钠清洗柱子5～6小时或用0.1M的氢*化钠24小时。或用以下方法步骤去除：
① 2倍柱体积的70%乙醇；
② 2倍柱体积50mM Tris-HCl pH7.5；
③ 1倍柱体积4M尿素；
④ 3倍柱体积的Tris缓冲液+0.1M NaCl；
  以上缓冲液都在无热源的双蒸水中配制。
9．消毒
  用0.5～1M NaOH室温下洗8～10倍柱体积，初始缓冲液平衡柱子。
10．灭菌
  置介质于高压灭菌锅中120℃下30分钟。

注意事项：
产品应密封贮存在4～25℃（保存溶液为20%乙醇），通风、干燥、清洁的地方。不能冷冻。用过的柱子贮存在4℃（20%乙醇）。避免与氧化剂接触；避免在pH<4的环境中长时间暴露(一周,20℃)。