Bonamia ostreae牡蛎包拉米虫染料法荧光定量PC

本公司开 的PCR 检测试剂盒，它具有下列特点： 1.即开即用，用户只需要提供病毒 DNA 模板。 2.引物经过优化，灵敏性比使用世界动物卫生组织推荐的引物高100 倍以上。 3.特异性高，引物是根据保守的 vp72 基因设计。 4.提供阳性对照，便于分析实验结果。 5.PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。 本试剂盒足够做 40μL 体系的PCR 50 次，只能用于科研。使用方法 一、样品 DNA 的制备 1.用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒DNAout。 2.如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个阳性对照和一个阴性对照。阳性对照是在 200μL 水中加 10μL PCR 阳性对照作为阳性对照，阴性对照是直接用 200μL 水作为阴性对照。提取结束后，最后得到 200μL 模板 DNA（每个样品）放冰上待用，溶解 DNA 沉淀的溶液 不能少于 200μL，否则PCR 抑制物很可能会抑制 PCR。二、PCR（60 μL 体系） 3.样品管：在 N+2 个PCR 管中加入下列成分： 成分 N 个样品管 阴性对照 阳性对照 PCR MagicMix 3.0 各 20 μL 20 μL 20 μL 非洲猪瘟PCR 引物对 各 2 μL 2 μL 2 μL 样品 DNA 模板 各 18 μL - - 阳性对照（纯化后） - 18 μL - 阴性对照（纯化后） - - 18 μL 电泳检测 5.取 10-20 μL PCR 产物直接进行琼脂糖凝胶电泳（本产品不需要单独加loading buffer），最好使用 100 bp DNA Marker，如果样品为阳性，将会得到长度为 638 bp 的扩增产物。