- ¥1690
- 钦诚生物
- QC-P-141
- 2025年07月07日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
12个月
- 库存：
大量
- 供应商：
钦诚生物
- 规格：
50T
- 即开即用，用户只需要提供样品模板，操作简单，定量准确快速。
- 荧光定量 PCR 检测，反应特异性强。
- 提供阳性对照，便于分析实验结果。
本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
规格及成分
| 成分 | 编号 | 50 次塑料袋包装 |
| 2×qPCR Mix | 90408 | 1.0 mL |
| stn 专一性引物对 | yw13891390 | 200 μL |
| stn 阳性对照， XXX 10E9 拷贝/μL |
yw13911392 |
100 μL |
| 超纯水 | 100935 | 1 mL |
| 使用手册 | 1 份 | |
低温运输，-20℃保存，保存期限一年。
使用方法
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取细菌样品 DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 stn 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓
度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本 试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供 活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
- 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
- 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（最好用带芯枪头，下同）。
- 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到
- 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
- 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5 拷贝/μL 的阳性对照。
- 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。
- NC 管中不加任何阳性对照。
- 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值， 并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
- PCR 检测（20 μL 体系）
- 在 PCR 管中加入下列成分（待测样品需要做三次重复，下表只列出一次）
注:仅 ABI7500、7700 和 7900 仪器需要使用 ROX 作为对照，其他荧光 PCR 仪器（如 iCycler IQ、MJ Option、MJ Chromo4、MX3000、MX4000、RotorGene 3000、RotorGene 6000 和 LightCycler480）不需要使用 ROX。
- 建议 PCR 反应参数（具体 PCR 参数可以根据仪器不同而自行优化）
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 93℃ | 5 min |
| PCR 反应 （40 个循环） |
93℃ | 35 s |
| 55℃ | 45 s |
按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合
DNA 时，最大吸收光谱在 471 nm，结合 DNA 时的最大吸收光谱在 500 nm， 最大发射光谱在 530 nm。
四、数据处理
以 stn 阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再
以待测样品浓度的 log 为横轴，以 Ct 值为纵轴，通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
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文献和实验真菌门、子囊菌纲、散囊菌科。菌丝体发达，分枝繁茂，菌丝有隔。繁殖方式有无性和有性两种类型，但有性生殖仅见于极少数种类，最普遍的是进行无性生殖。正因如此，也有人常将曲霉放在半知菌纲中。无性生殖时，从菌丝体上产生大量的分生孢子梗，梗端膨大成球形的泡囊，从泡囊表面呈辐射状生出1层或 2层小梗，在小梗顶端各产生一串分生孢子，小梗若为 2层时，仅外层小梗顶端产生分生孢子。曲霉的种类也不少，不同的种其分生孢子的颜色也不同，有黑、黄、绿、白等各种各样，并由此形成各种色彩的菌落。少数种类已发现进行有性
霉菌中的一群，包括米曲霉、黑曲霉等。一般是从匍匐于基质上的菌丝向空中伸出球形或椭圆形顶囊的分生孢子梗，在其顶端的小梗或进一步分枝的次级小梗上生出链状的分生孢子．在不具有性生殖的种类中虽少，但都产生封闭的子囊果。以米曲霉为主的霉菌，大都和酒、豆酱、酱油等的酿造有密切关系。一方面有很多菌种可被用于各种有益物质的生产，如用于蛋白消化剂的蛋白酶（酱油曲霉）、柠檬酸（黑曲霉）、衣康酸（土曲霉、解乌头酸曲霉）以及曲酸（黄曲霉）等。但另一方面，也有不少侵害家禽、家畜甚至人体内脏特别是呼吸器官的病菌
真菌门、子囊菌纲、曲霉属。腐生菌。菌丝疏松，表面黄绿色，背面无色或略呈褐色。菌丝多分枝，具隔，无性生殖发达，无性生殖时产生大量的分生孢子梗，梗端膨大成球形的泡囊，在泡囊表面又生出呈放射状排列的小梗，每个小梗顶端产生成串的分生孢子，呈黄绿色。由于其有性生殖极少见，所以也常将黄曲霉归入半知菌纲中。黄曲霉分解有机物的能力很强，常用黄曲霉的一些菌系作为酿酒、做酱、制醋的菌种，和生产淀粉酶和蛋白酶。但是有些黄曲霉菌株能产生黄曲霉毒素，可引起人、畜和禽类的肝脏致癌。黄曲霉毒素尤以在发霉的花生中含量
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