- ¥1000
- 钦诚生物
- 上海
- QC90020
- 2025年07月06日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
负20度
- 保质期：
2年
- 供应商：
钦诚生物
- 规格：
5ug
基本信息
| 原核抗性: | Kan |
|---|---|
| 筛选标记: | Hyg |
| 克隆菌株: | DB3.1 |
| 培养条件: | LB/37℃ |
质粒图谱
pCXSN-Myc质粒菌种使用说明：
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；
3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；
4、42℃热激90s，再冰浴2min；
5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；
8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。
pCXSN-Myc质粒菌种注意事项：
1、如果您收到的是甘油菌种，请先四区划线，挑取单克隆培养。
2、如果第二天转化平板长的过多，请将质粒按比例稀释后再转化。
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文献和实验PCDNA3.1(-)-flag-mTOR（human） PCDNA3.1(-)-Flag PCDNA3.1-3HA PCDNA3.1(+)/myc-His PCDNA3.1-myc-his B pLKO.1-EGFP PYES2.0 ProkII
【求助】MDCK转染与免疫荧光问题，解决问题追加丁当，谢谢！
wen-wen 实验组：将带有c-myc和UT-B的pcDNA3.0质粒转染到MDCK细胞当中 对照组：1、将带有c-Myc和AQP1的pcDNA3.0质粒转染到MDCK细胞； 2、将GFP的质粒（就是一个只有GFP的质粒，没有UT-B,AQP1）转染MDCK细胞中，主要目的是想看我的操作技术怎么样； 3、过表达AQP1-MDCK的稳转细胞系。 然后通过免疫荧光来证实转染结果。（因为质粒若带有GFP会影响
明书的操作步骤操作以确保残留的 Rinse B 被甩干。 7.为什么提出的质粒的多是二聚体和多聚体形式？ 是在质粒复制过程中形成的，与宿主菌相关，电泳可检测出。 8.质粒为何会丢失？ 细菌培养不要超过 16 小时，否则细菌会崩溃，引起细菌大量死亡，导致质粒丢失。有些质粒本身不能在某些菌种中稳定存在，经多次转接后有可能造成质粒丢失。因此不要频繁转接，每次接种时应接种单菌落。另外，检查筛选用抗生素使用浓度是否正确。 9. 大肠杆菌老化： 请涂布平板培养后，重新挑选新菌落进行液体培养。 10
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