- ¥800 - 1500
- 钦诚生物
- 上海
- QC5312
- 2025年07月11日
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企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
负20度
- 保质期：
2年
- 供应商：
钦诚生物
- 规格：
2UG/5UG
| 规格： | 2UG | 产品价格： | ¥800.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 5UG | 产品价格： | ¥1500.0 |
基本信息
| 别名: | BBC77939.1 |
|---|---|
| 原核抗性: | Amp |
| 筛选标记: | Puro |
| 克隆菌株: | Stbl3 |
| 培养条件: | LB/37℃ |
质粒图谱
pCDH-CMV-Akaluc-EF1-CopGFP-T2A-Puro人源基因质粒使用说明：
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；
3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；
4、42℃热激90s，再冰浴2min；
5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；
8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。
pCDH-CMV-Akaluc-EF1-CopGFP-T2A-Puro人源基因质粒注意事项：
1、如果您收到的是甘油菌种，请先四区划线，挑取单克隆培养。
2、如果第二天转化平板长的过多，请将质粒按比例稀释后再转化。
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，总有一个基因没有表达？请大家出出主意是什么问题？哪些实验方法可以帮助发现问题。 我想了几下原因： 1。各个基因表达的不均衡性，可能是marker基因表达太弱。不能被检测 2.可能是不同基因的启动子不一样，我的是CMV和EF1，细胞对启动子不敏感 3.外源基因的启动子被沉默失效 4.存在基因剪切错误的问题，但是我的基因链接是用T2A，可以剪切的。 只能想到这些问题。 老板让分析一下。但我对这方面了解不是很多。我准备用PCR
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pCDH-CMV-Akaluc-EF1-CopGFP-T2A-Puro人源基因质粒
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