柱式质粒大量提取试剂盒

特别提示：包括柱式质粒大量提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：柱式质粒大量提取试剂盒
英文名称：A large number of Plasmid Extraction Kit (centrifugal column type)
产品货号：ALH088
产品规格：10次

本试剂盒适用于大规模高纯度质粒制备。采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞，离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA，再通过漂洗液将杂质和其它细菌成分去除，zuì后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。

试剂盒组份(10次)：
RNaseA(10mg/ml)-————————0.75ml
溶液P1—————————————75ml
溶液P2—————————————75ml
溶液P3—————————————110ml
漂洗液WB————————————50ml
洗脱缓冲液EB——————————20ml
吸附柱和收集管(50ml)——————10套

试剂盒特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯*、lǜ仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。快速、方便，从100-200ml大肠杆菌LB((Luria-Bertani)培养液中，可快速提取0.2-0.5mg纯净的高拷贝质粒DNA，提取率达80 %左右。
3.获得的质粒产量高、超螺旋比例高、纯度好，可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。

注意事项
1. 所有的离心步骤如未加另外说明均在室温完成，使用转速可以达12000g，带50ml转头的台式离心机。
2. 溶液P3中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
3. 提取质粒的量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb 的大质粒，应加大菌体使用量，同时按比例增加P1、P2、P3的用量，洗脱缓冲液应在70℃预热。可以适当的延长吸附和洗脱的时间，提高提取效率。
4. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带，也可能为2条或者多条DNA条带，这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成，与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。
5. 质粒DNA确切分子大小，必须酶切线性化后，对比DNA分子量Marker才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的质粒，泳动位置不确定，无法通过电泳知道其确切大小。
6. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱， 但应该确保pH大于7.5，pH过低影响洗脱效率。用水洗脱，质粒应该保存－20℃。质粒DNA如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。
储存条件：室温，有效期12个月。

本制品别名：质粒大量提取试剂盒|质粒大量制备试剂盒|大量质粒提取试剂盒|大量质粒制备试剂盒

除了柱式质粒大量提取试剂盒,质粒大量提取试剂盒|质粒大量制备试剂盒|大量质粒提取试剂盒|大量质粒制备试剂盒，我公司还供应以下相关产品：



名称：石蜡包埋组织DNA提取试剂盒
货号：BTN70502
规格：30次
本试剂盒是专门用于从jiǎ醛和非jiǎ醛固定的石蜡包埋组织中快提基因组DNA的试剂。石蜡包埋组织本是珍贵的分子生物学研究材料，但是由于它们的保存时间一般都比较长，很不容易从中提取到高质量的DNA，存在的主要问题是DNA的断裂和脱蜡过程中样品的丢失。

产品特点：
1.一管式操作，避免了可能的交叉污染和样品DNA的丢失。
2.含一步离心式脱蜡试剂，不需要使用有毒的二甲*，健康环保。
3. 得到的提取物可以直接用于PCR反应。
4. 得到的DNA的OD260/280一般在1.6左右，长度在0.4-25 Kb 之间，可以直接作为PCR 模板。
5. 即开即用，客户自己不需要准备额外的试剂。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	30ml
溶液B	3ml
溶液C	5ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存(溶液C需要-20℃保存)，有效期一年。

使用方法：
1. 将一片常规的石蜡包埋组织切片转移到1.5mL塑料离心管(zuì好使用螺旋盖离心管)中并加入1mL溶液A，在振荡器上以zuì大速度振荡10秒。
2. 加入75μl溶液B，在振荡器上以zuì大速度振荡10秒。
3. 7000g室温离心2分钟，溶液将形成两个相，其中组织切片位于下相。
4.小心吸弃上层液体。
5. 将离心管放入真空离心机中，7000g离心，抽干下层的液体，一般需要一小时。
6. 加入150μL溶液C，55℃保温过夜。
7. 7000g 短暂离心，95℃保温10分钟。
8. 7000g室温离心5分钟，转移上清到新的离心管中待用。
9. PCR 检测时，一般在50μl PCR体系中加入1-5μL的模板DNA。
 注意:很多时候样品中会有未明的PCR 抑制物，多加模板反而会抑制PCR反应。加入百奥莱博的PCR抑制物清除剂(BTN60804)可能会有帮助。