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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
419
- 英文名:
Prestained Protein Marker(3.3kD-31.0kD)
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
20T
特别提示:包括超低分子量预染蛋白Marker(3.3~31.0kD)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:超低分子量预染蛋白Marker(3.3~31.0kD)
英文名称:Prestained Protein Marker(3.3kD-31.0kD)
产品货号:QN2659
产品规格:20T
本产品包含预染的3种多肽和2种低分子量蛋白质组成,分子量范围为3.3kD-31.0kD。可以用于直接观察蛋白质电泳状况以及清晰地判断Western Blot的转膜效果。经Tricine-甘油SDS-PAGE凝胶电泳时以及转移到PVDF或NC膜上可看到清晰的5条蓝色的蛋白条带。本品为蛋白质和多肽混合物的冻干粉,每种预染蛋白含量约为40μg,配有一支1×上样缓冲液。
使用说明:
1.开封后,溶于200 μ1 1×上样缓冲液,可根据需要进行小量分装,每管10μl,-20℃贮存,每次取一管使用,避免反复冻融。
2.使用前取分装后的小管室温融化后即可上样电泳。
示意图:
凝胶制备及染色注意事项:
1.先配制分离胶,聚合后再配制夹层胶,zuì后配制浓缩胶,3种胶的制胶体积比为4:1.5:1。电泳时,30V跑1-2h后,待指示前沿到达分离胶上沿时,把电压调至100V,至电泳结束,整个电泳过程大约需要6-8h。
2.电泳之后可将胶置于固定液中固定20min,再进行染色,能得到较好的蛋白条带;如时间不允许,也可不进行固定直接染色。如果使用配方7进行染色时效果不好或考虑其毒性,请选择本公司的考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液(货号:QN1106),该产品具有染色快,无毒,灵敏性高等特点,是常规染色液的替代品。
3.由于多肽所含的氨基酸数目较少,因此如该多肽含有过多的极性氨基酸(碱性或酸性),则会影响其在SDS-PAGE图上的条带迁移率,即其表观分子量可能和多肽的氨基酸理论推算分子量有一定距离。
4.由于SDS-PAGE的图谱上,蛋白质对数分子量和迁移率成正比直线关系的分子量范围为15,000-200,000,因此对于分子量小于10000的蛋白质或多肽的分子量,只能根据标准分子量进行估计,推断其是否落入预测的分子量范围。
5.由于超低分子量多肽(3000及3000以下),极易从凝胶上浸出,因此染色及脱色时间不宜太长,脱色后凝胶也不宜在水中浸泡保存过久,否则条带会消失。
储存条件:-20℃保存,有效期为一年。避免反复冻融,建议分装冻存。
除了超低分子量预染蛋白Marker(3.3~31.0kD),,我公司还供应以下相关产品:
名称:一站式Tricine-SDS-PAGE套装
货号:BTN81205
规格:30次
名称:预染蛋白Marker(14.4~97.4kD)
货号:BTN70704A
规格:10次
本产品为蛋白质电泳标准系列,是预染成蓝色的数个标准蛋白质的混合物,在SDS-PAGE时和转膜后可以作为分子量标准,粗略估计其他蛋白质的分子量大小。
产品特点:
1.提供干粉型或溶液型,即开即用,非常方便。
2.预染色,在电泳过程中可以观察蛋白质的泳动,也可以监测转膜效果。
3.可用于SDS-PAGE和Western Blot等实验。
4.本系列两种产品涵盖从14.4kD-200kD的分子量范围,单次上样,每个条带的浓度约为0.2μg/μL。
产品组成:
| 成分 | A型 | B型 |
| 预染蛋白标准(低分子量) | 20T | - |
| 预染蛋白标准(高分子量) | - | 10T |
| 1×SDS-PAGE上样液 | 0.5ml | 0.5ml |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一、干粉型的使用
1.开封后将1×SDS-PAGE上样液加入到样品管中溶解蛋白质粉末,各分子量标准所需的1×SDS-PAGE上样液的体积如下:
低分子量标准(BTN70704A)需要200μL。
中分子量标准(BTN70704B)需要100μL。
2.低分子量标准(BTN70704A)沸水浴中加热5分钟,短暂离心后将溶液按每管10μL的体积分装到多个塑料离心管中,置-20℃长期保存。
中分子量标准(BTN70704B)待完全溶解后,直接按每管10μL的体积分装到多个塑料离心管中,置-20℃长期保存。
3.使用时每次取一管,低分子量标准(BTN70704A)室温放置直到液体融化后即可上样进行SDS-PAGE电泳。中分子量标准(BTN70704B)需要在使用前65℃保温5分钟,然后上样进行SDS-PAGE电泳。BTN70704A型推荐使用12%的分离胶、BTN70704B推荐使用8%的分离胶。
4.电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色,染色后出现的带型见上表。
二、溶液型的使用
1.将溶液按每管一次电泳的用量分装到塑料离心管中冻存,每次只用一管,这样避免反复冻融。
2.使用时取一管室温放置直到液体融化。
3.沸水浴中加热3~5分钟后趁热上样并进行SDS-PAGE电泳。BTN70704A型推荐使用12%的分离胶、BTN70704B推荐使用8%的分离胶。
电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色,染色后SDS-PAGE胶上将可见6条蛋白带(对BTN70704A)或6条蛋白带(对BTN70704B),但由于共价结合了染料分子,各预染蛋白的分子量均稍大于染色前的蛋白,所以如果不需要精确估算未知蛋白的分子量,一般以染色前的各蛋白质的分子量作为参考。如果需要精确估算未知蛋白的分子量,则必须使用非预染蛋白电泳标准系列产品(BTN70102),以避免误差。
本系列产品所含成分及分子量分布
| 分子量范围 | 低分子量 | 高分子量 | |
| 肌球蛋白重链 | 200kD | 有 | |
| 钙调素结合蛋白 | 130kD | 有 | |
| 兔磷酸化酶B | 97.4kD | 有 | 有 |
| 牛血清白蛋白 | 66.2kD | 有 | 有 |
| 兔肌动蛋白 | 43kD | 有 | 有 |
| 牛碳*酐酶 | 31kD | 有 | |
| 人生长激素 | 22kD | 有 | |
| 大豆胰蛋白酶抑制剂A | 20.1kD | ||
| 鸡蛋清溶菌酶 | 14.4kD | 有 | |
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子量蛋白标准 通常在检测大分子量蛋白经常使用到高分子量蛋白标准, ③ 低分子量蛋白标准 在一般的蛋白电泳当中,更常用的是低蛋白标准分子量,除了有指示蛋白大小的作用以外,有时还可以用作粗略的定量。实验室用在一般蛋白电泳的低分子量蛋白标准中。 在低分子量蛋白标准这里还包括可特别小的蛋白标准,比如30kD以下蛋白或者多肽的分离辨别。其中GE的从2kD到16kD之间有6条带的蛋白标准挺不错,另外提醒一句,特别小的蛋白Marker条带如果要显色
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