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16S/18S/ITS微生物测序

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  • 16S rDNA测序/18S rDNA测序/ITS测序
  • 北京
  • 2025年07月15日
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      北京百奥创新科技有限公司

    • 服务名称

      16S/18S/ITS微生物测序

    16S/18S/ITS微生物测序
    产品介绍
    微生物群落多样性分析是指利用二代高通量测序技术,对微生物的16S rDNA、18S rDNA以及ITS高变区域,或者功能基因进行测序,分析环境中细菌、古细菌以及真菌的种类组成和含量,揭示环境样品中微生物种类以及它们之间的相对丰度和进化关系,进一步探讨微生物多样性;对于研究微生物与人类医疗健康、食品安全、环境检测与治理、微生物资源的利用等有着重要的理论和现实意义。

    产品分类
    16S rDNA测序:16S rDNA为编码原核生物核糖体小亚基rRNA的DNA序列,存在于所有细菌染色体基因中,共包括9个可变区和10个保守区,保守序列区域反映了生物物种间的亲缘关系,而高变序列区域则能体现物种间的差异。采用HiSeq或最new的MiSeq测序仪,对16S rDNA某个高变区进行测序,进一步分析环境微生物中细菌或古细菌的多样性。
    18S rDNA测序:18S rDNA为编码真核生物核糖体小亚基rRNA的DNA序列。在结构上分为保守区和高变区,保守区反映生物物种间的亲缘关系,高变区反映物种间的差异。
    ITS测序:ITS分为两个区域:ITS1/ITS2,其中ITS1位于真核生物核糖体rDNA序列18S和5.8S之间,ITS2位于真核生物核糖体rDNA序列5.8S和28S之间。ITS序列由于自然选择压力小,因此在进化过程中能够承受更多的变异,通过对ITS1或者ITS2进行测序,可分析环境微生物中真菌的多样性。
    技术流程

    技术参数
    测序平台:HiSeq2500;MiSeq
    测序策略:PE250
    测序周期:25-40工作日
    测序数据:不低于合同规定数据量
    标准数据分析
    ● 原始测序数据预处理   
    ● 稀释曲线(Rarefaction Cur ve)   
    ● OTU划分&OTU注释&物种分类注释   
    ● 物种系统发育树
    ● 多样性指数分析  
    ● 物种组成统计热图   
    ● 群落结构:OTU分类   
    ● 物种丰富程度&均匀程度(Rank Abundance曲线)
    ● 主成分分析(Principal component analysis, PCA)
    深度数据分析

    ● 多样品OTU分布网状图(Network)   
    ● 单因素方差分析   
    ● 多样品O TU分布比较(Venn图)
    ● 多样品(微生物群落)分层聚类UPGMA    
    ● 样本聚类UP GMA可靠性Support分析
    ● 主坐标分析PCoA(2D/3D)图   
    ● 基于Unifrac 距离的箱型图(Box-Plot)分析
    ● 含分类单元主坐标分析PCoA图(3D Bi-Plot)  
    ● 差异对比NMD S分析
    ● 冗余分析RDA(线性模型)/典型对应分析CCA(单峰模型)   
    ● 含多样品分类饼图
    ● LEfSe分析(组间比较分析)   
    ● Adonis组间比较分析(基于Unifrac距离矩阵)
    引物信息

    样本要求
    粪便:采集新鲜粪便样品于无菌容器中,每份样品5g左右即可,液氮速冻3-5min,-80°C长期保存,干冰运输。
    土壤:采集土壤样本5g左右至无菌容器中,液氮速冻3-5min,然后转移至-80°C 或液氮中长期保存,干冰运输。
    污泥:采集污泥样本于无菌容器中,每份样品5g左右即可,液氮速冻3-5min, -80°C长期保存,干冰运输。
    水体:1、对于水质较为清澈的水样,用0.22μm 的微孔滤膜真空过滤水样(1 L左右),富集于无菌管中,液氮速冻3-5min,干冰运输。2、对于水质较为混浊的水样,三点水样混合摇匀后取60-80mL,液氮速冻3-5 min,-80℃保存,干冰运输。
    皮肤:采用无菌棉签轻轻刮取皮肤表面,取样后将棉签置于无菌的离心管,液氮速冻3-5min,-80℃长期保存,干冰运输。

    服务流程
    1、提交项目课题相关需求和资料。
    2、与我们的专业技术团队讨论项目细节。
    3、根据讨论后的意见对实验方案进行修改。
    4、双方均满意并达成一致,签订技术服务合同。
    5、开展实验,按期完成合同规定的内容。
    6、结题,提供实验原始结果和分析结果、实验流程、实验条件等等。
    我们的优势
    1、适用于单细胞、微量细胞样品。
    2、数据质量高、偏差小、高度均一。
    3、高通量,单个样本可达30-100X的测序深度和数据产出量。
    4、极高的覆盖度,能检测到90%以上的SNP位点信息。
    5、检测灵敏度和准确度高。
    6、能够全面发掘新的和稀有的遗传变异
    咨询与订购
    感谢您选择我们的服务,如果您有任何问题,请联系我们,我们将竭诚为您解答和服务。
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