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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
1000
- 适应物种:
人/动物/植物
- 应用:
仅供科研研究使用
- 检测方法:
ELISA 法
- 供应商:
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 规格:
96T/48T
人RNA聚合酶转录终止因子Ⅰ(TTF1)ELISA试剂盒实验试剂前准备:
样本收集,加样,温育,洗涤,显色,比色,结果判定等,其中任何一项操作不当都会对检测结果产生很大影响,必须加强ELISA检测的全面质量控制,保证其结果的准确可靠。
选择人RNA聚合酶转录终止因子Ⅰ(TTF1)ELISA试剂盒实验抗凝的注意点:
① 每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致。
② 收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固。
③ 抗凝全血收集的血浆相对较多。
④ 抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后。
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文献和实验。) 使用不同的聚合酶 通常用于体外转录的三种 RNA 聚合酶可以相互不同地转录给定的模板。当转录不能完成时,可以充分利用这种转录给定模板序列的不同能力。改变转录模板前面的聚合酶启动子序列是一种劳动密集型修复,因为它可能需要设计 PCR 引物或亚克隆。Ambion 具有可简化过程的载体和引物。pTRIPLEscript 系列载体具有串联排列的 SP6、T7 和 T3 启动子,这些载体特别适用于亚克隆转录模板。或者,Ambion 的无克隆启动子添加试剂盒 Lig'nScribe 可用于改变可 PCR 扩增
产物的 DNA:RNA 杂交链变性后利用大肠杆菌 DNA 聚合酶Ⅰ Klenow 片段或反转录酶合成 cDNA 第二链,最后用对单链特异性的 S1 核酸酶消化该环,即可进一步克隆。但自身引导合成法较难控制反应,而且用 S1 核酸酶切割发夹结构时无一例外地将导致对应于 mRNA 5' 端序列出现缺失和重排,因而该方法目前很少使用。 2、置换合成法: 该方法利用第一链在反转录酶作用下产生的 cDNA:mRNA 杂交链不用碱变性,而是在 dNTP 存在下,利用 RNA 酶H在杂交链的 mRNA 链上造成切口
退火,并由DNA聚合酶催化引物延伸生成双链靶DNA, 最后扩增靶DNA。cDNA第二链的合成方法有以下几种: 1、自身引导法 合成的单链cDNA 3'端能够形成一短的发夹结构,这就为第二链的合成提供了现成的引物,当第一链合成反应产物的DNA:RNA杂交链变性后利用大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ Klenow片段或反转录酶合成cDNA第二链,最后用对单链特异性的S1核酸酶消化该环,即可进一步克隆。但自身引导合成法较难控制反应,而且用S1核酸酶切割发夹结构时无一例外地将导致对应于mRNA 5'端序列出现缺失和重排
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