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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
1000
- 适应物种:
人/动物/植物
- 应用:
仅供科研研究使用
- 检测方法:
ELISA 法
- 供应商:
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 规格:
96T/48T
人RPE脊椎蛋白(RPESP)ELISA试剂盒实验试剂前准备:
样本收集,加样,温育,洗涤,显色,比色,结果判定等,其中任何一项操作不当都会对检测结果产生很大影响,必须加强ELISA检测的全面质量控制,保证其结果的准确可靠。
选择人RPE脊椎蛋白(RPESP)ELISA试剂盒实验抗凝的注意点:
① 每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致。
② 收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固。
③ 抗凝全血收集的血浆相对较多。
④ 抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后。
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多篇 SCI 发现用 RIPA 提蛋白存在问题,我们该如何应对?
这篇综述重点说明使用 RIPA 裂解液提取总蛋白以及下游实验中可能存在的问题。RIPA 裂解液常用于从脊椎动物细胞和组织中提取总蛋白 [1]。但是由于蛋白质间有较大的差异和非蛋白成份的干扰,所以从一个样本中同时释放和溶解所有蛋白质是非常困难的。特别是一些整合到膜上的蛋白质,或与其他蛋白质 / 核酸形成复合物时,就大大阻碍了提取效率。因此可以推断,蛋白质在提取过程中或多或少的与在体内时真实情况不尽相同。经典 RIPA 裂解液中含有低浓度的十二烷基硫酸钠(SDS 变性剂),脱氧胆酸(干扰蛋白质间
化。最常见的形式是 H2A 上 K119 和 H2B 上 K123(酵母)/K120(脊椎动物)的单泛素化。H2A 单泛素化与基因沉默有关,而 H2B 与转录激活有关。 多聚泛素化较少见,但在 DNA 修复中也很重要。H2A 和 H2AX 在 K63 上的多聚泛素化为 DNA 修 复蛋白(如 RAP80)提供了一个识别位点。 酶调节 与其他组蛋白修饰一样,H2A 和 H2B 的单泛素化具有可逆性,并受到组蛋白泛素连接酶和去泛素化 酶的严密调控。 单泛素化 H2A:多梳蛋白家族 H2
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