细胞名称 |
HES 人胚胎干细胞 |
产品货号 |
CQ80231 |
种属/性别/年龄 |
人 |
组织来源 |
胚胎 |
生长特性 |
圆形克隆,贴壁 |
生长培养基 |
人胚胎干细胞完全培养液 |
细胞检测 |
不含细菌、真菌、支原体污染 |
培养条件 |
气相:空气,95%; CO2,5% 温度:37℃ |
冻存条件 |
50%完全培养基+40%FBS+10%DMSO |
已通过STR鉴定/想了解更多细胞信息/可咨询传秋生物官网
细胞名称:HES人胚胎干细胞|HES细胞
培养基和添加剂
D-MEM/F-12培养基(GIBCO,货号12400024,添加L-glutamine 150mg/L, NaHCO3 1.5g/L)及0.005 mg/ml 胰岛素,90%;优质胎牛血清,10%。 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度。
供应限制
A。仅供研究之用。
运输保存:采用干冰保存运输。收到细胞时,若干冰已经完全融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。
人胚胎干细胞一般培养方法:
1、组织块培养法
A)按照前述方法取材,将组织剪成或切成1mm3大小的小块,并加入少许培养基使组织湿润。
B)将小块均匀涂布于瓶壁,每小块间距0.2 cm~12.5px,一般在25mL培养瓶(底面积为437.5px2)可接种20~30小块为宜,小块放置后,轻轻翻转培养瓶,使瓶底朝上,然后于瓶内加入适量培养基盖好瓶塞,将瓶倾斜放置在37℃温箱内。
C)培养2~4小时,待小块贴附后,将培养瓶缓慢翻转平放,静置培养,动作要轻,严禁摇动和来回振荡,以防RL95-2人子宫内膜癌细胞由于冲动而使小块漂起而造成培养失败,若组织块 不易贴壁可预先在瓶壁涂一薄层血清、胎汁或鼠尾胶原等。开始培养时培养基不宜多,以保持组织块湿润即可,培养24小时后再补液,培养初期移动和观察时要轻 拿轻放,开始几天尽量不去搬动,以利贴壁和生长,培养3~5天时可换液,一方面补充营养,一方面去除代谢产物和漂浮小块所产生的毒性作用。
2、消化培养法
该方法是采用前述的消化分散法,将妨碍细胞生长的细胞间质(包括基质、纤维等)去除,使细胞分散形成细胞悬液,然后分瓶培养。
3、悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
细胞其它细胞株列表:
YBC3379 人肾癌细胞 A498-EGFP-puro
YBC3380 小鼠成纤维细胞 L929-EGFP-puro
YBC3381 人胃癌细胞 BGC-823-EGFP-puro
YBC3382 小鼠肝癌细胞 Hepa1-6-EGFP(CMV-GFP慢病毒构建稳定株)
YBC3383 小鼠骨髓基质细胞 P9-EGFP-puro
YBC3384 小鼠Lewis肺癌细胞 LLC-RFP-puro
YBC3385 人胚肺成纤维细胞 MRC-5-EGFP+puro
YBC3386 人骨肉瘤细胞 U-2 OS-EGFP+puro
YBC3387 人肝癌细胞(高转移) MHCC-97H
YBC3388 人肝癌细胞(低转移) MHCC-97L
运输和保存
可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:
(1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;
(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
(3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。
HES 细胞人胚胎干细胞,ATCC细胞
规格:70%密度的25cm2培养瓶的细胞一瓶
特点:细胞代数为2-3代
包装:内层无菌自封袋;防压泡沫盒;外层防压保温气泡袋;说明书
细胞来源:ATCC
货期:1-2周
运输方式:快递运输
售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时传真或E-mail致销售人员,我们将尽快为您解决。
HES 细胞人胚胎干细胞,ATCC细胞复苏基本技术:
●从液氮容器中取出细胞冻存管后,立即将细胞冻存管直接浸入37%水浴中,在1-2分钟内摇动细胞冻存管至冻存的细胞融化。
●用75%酒精消毒细胞冻存管后,小心打开盖子,用吸管吸出细胞悬浮液至15ml离心管中,缓慢加入5ml培养基后800rpm离心5分钟,弃上清,加3-5ml培养基重悬至细胞培养瓶中,然后放入5CO2、95%空气、37℃培养箱静置培养。
注:建议使用新鲜配制的培养体系
●另外,细胞计数,确定细胞数量
●24小时更换一次培养液,继续在5%CO2、95%空气、37℃培养箱静置培养。
注:建议使用新鲜配制的培养体系
HES 细胞人胚胎干细胞,ATCC细胞注意事项:
1、 培养基于 4℃条件下可保存 3-6 个月;
2、 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作;
3、 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生 长状态;
4、 该细胞只可用于科研。
HES人胚胎干细胞|HES细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备RPMI-1640培养基;优质胎牛血清,10%;添加0.01mg/ml胰岛素;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。