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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 亚型:
IgG
- 保存条件:
Store at -20 °C
- 库存:
20-60
- 供应商:
上海邦景
- 浓度:
1mg/ml
- 抗体英文名:
42073
- 规格:
0.1ml
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文献和实验免疫印迹(Western blot)简介和原理 免疫印迹用于鉴定能够与特异性抗体相互作用的大分子抗原(一般为蛋白质)并测定抗原的大小。蛋白质首先通过 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,再通过电泳转移到固相支持物上,固相支持物包括硝酸纤维素膜,聚偏乙烯二氟(PVDF)膜和阳离子尼龙膜等。首先把膜上未反应的位点封闭起来以抑制抗体的非特异性吸附,这样固定的蛋白即可与特异性的多克隆或单克隆抗体相互作用。最后通过放射,生色或化学发光的方法进行定位。 实验常规试剂 1.0 mol/L Tris•HCl
相关专题 主要包括以下 4 个基本步骤:样品制备;电泳分离;蛋白的膜转移;免疫 杂交与显色――蛋白检测。 溶液和试剂 1. 1X 磷酸盐缓冲液(PBS ) 2. ModifiedRIPAbuffer:Tris-HCl:50 mM, pH 7.4; NP-40: 1%;Na-deoxycholate: 0.25%;NaCl: 150 mM;EDTA :1 mM;PMSF: 1 mM
取决于使用的抗体的纯度。伴随捕捉抗体而产生的假阳性信号:有许多因素可能会影响捕捉抗体发生 非特异性结合反应。产生假阳性信号可以归结于疏水作用力、非特异性免疫反应 、 抗体中的添加物、带有大量的正电荷、在与胶体金颗粒吸附的捕捉抗体中富有高 浓度的含硫氨基酸。在标记过程中这些因素都会引起抗体与胶体金颗粒表面吸附 并与其结合。在实际的工作中,作用于捕捉抗体的这些因素会危及到快速检测技 术的效能。与固相支持物相关的问题 硝酸纤维素膜非常脆并且在接触时很容易受到破 坏。因此在撕开膜的过程中避免与膜发生
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