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203
- 英文名:
Tacrolimus-Peroxidase Conjugate
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长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
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-20℃
- 规格:
100μg/200μg
特别提示:包括HRP标记他克莫司在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:HRP标记他克莫司
英文名称:Tacrolimus-Peroxidase Conjugate
产品货号:GH0491
产品规格:100μg/200μg
本制品是他克莫司(Tacrolimus)与辣根过氧化物酶(HRP)经化学交联获得的偶联物。本品溶于PBS(pH7.4)中,蛋白浓度≥1mg/ml,含BSA及甘油等酶稳定剂,可作为标记物用于抗体的制备,抗体及其他克莫司的免疫检测。稀释后可用于他克莫司的免疫检测,ELISA法1:3000~5000。
他克莫司(Tacrolimus)又名普乐可复、FK506、大环哌南(Prograf,FK506),是一种新型强效免疫抑制性大环内酯类抗生素。对T细胞有选择性抑制作用,主要通过与细胞内免疫嗜素(Immunophilin)FK结合蛋白(FK506 Binding Protein,FKBP)结合而抑制Th细胞释放IL-2、IL-3、IFN-γ并抑制IL-2R表达。临床上主要用于抗移植排斥反应,也可用于治疗系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等自身免疫病。他克莫司是从链霉菌属(Streptomyces Tsukubaensis)中分离出的发酵产物,其化学结构属23元大环内酯类抗生素。为一种强力的新型免疫抑制剂,主要通过抑制白介素-2(IL-2)的释放,全面抑制T淋巴细胞的作用,较环孢素(CsA)强100倍。近年来,作为肝、肾移植的一线用药,已在日本、美国等14个国家上市。临床实验表明,其在心、肺、肠、骨髓等移植中应用有很好的疗效。同时FK506在治疗特应性皮炎(AD)、系统性红斑狼疮(SLE)、自身免疫性眼病等自身免疫性疾病中也发挥着积极的作用。
保存条件:-20℃或以下温度保存。勿反复冻融或于4℃以上久置。
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文献和实验问:有没有做辣根过氧化物标记的朋友啊,能不能把你们的步骤发给我。本人开始做,发现很多人用的浓度都不一样。答:1.1 试剂准备1) 10mg/mL HRP2) 0.06mol/L NaIO43) 0.16mol/L乙二醇4) 碳酸盐缓冲液(Na2CO3 0.7952g NaHCO3 1.4702g 溶于500mL蒸馏水中,调pH值到9.5)5) 2.5mg/mL NaBH46) 0.01mol/L磷酸盐缓冲液,pH7.41.2 操作步骤1. 10mg/mL取HRP VmL,溶液为棕黄色,加入
一、戊二醛二步法1. 原理戊二醛为一种双功能试剂,通过其醛基分别与酶和免疫球蛋白上的氨基共价结合,形成酶-戊二醛-免疫球蛋白结合物。2. 标记步骤(1)称取HRP25mg溶于1.25%戊二醛溶液中,于室温静置过夜。(2)反应后的酶溶液经Sephadex G-25层析柱,用生理盐水洗脱。流速控制在1ml/1分钟,收集棕色流出液。如体积大于5ml,则以PEG浓缩至5ml。放置25ml小烧杯中,缓慢搅拌。(3)将待标记的抗体12.5mg用生理盐水稀释至5ml,搅拌下逐滴加入酶溶液中。(4)用1M
酶与抗体交联的方法有许多种,根据酶的结构不同可采用不同的方法。对于制备HRP结合物,可用戊二醛二步法和过碘酸钠法。尤以简易过碘酸钠法更为常用。 戊二醛二步法 1. 原理:戊二醛为一种双功能试剂,通过其醛基分别与酶和免疫球蛋白上的氨基共价结合,形成酶-戊二醛-免疫球蛋白结合物。 2. 标记步骤: (1) 称取HRP25mg溶于1.25%戊二醛溶液中,于室温静置过夜。 (2) 反应后的酶溶液经Sephadex G-25层析柱,用生理盐水洗脱。流速控制
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