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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
54
- 英文名:
NMY51 酵母感受态细胞
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
10×100μL
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的(—氯仿—=25:24:1),的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
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公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列,5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
以下是NMY51 酵母感受态细胞10×100μL费用的相关产品:
RNase 抑制剂 ( 人源 )400U 柱式 miRNA PAGE 胶回收试剂盒50 次
RNase 抑制剂 ( 人源 )2500U 柱式 G+细菌 RNAout50 次
RNase 抑制剂 ( 小鼠源 )3000U 柱式 DNA 清除剂50 次
RNase 抑制剂 ( 猪源 )500U 柱式 DNA 胶回收试剂盒50 次
非酶 DNA 清除剂1.5mL 柱式 DNA 胶回收试剂盒100 次
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DNA 电泳分子量标准 (100-5000 bp)50 次 亲和硅烷 25mL
DNA 电泳分子量标准 (300-10000 bp)50 次 亲和层析柱6 mL
DNA 电泳分子量标准 (2)(50-400 bp)50 次 亲和层析柱50 mL
DNA 电泳分子量标准 (2)(300-5000 bp)50 次 亲和层析柱30 mL
人白细胞分离液 1.078200mL 0.5mL DNA 离心超滤管 (90-150 KD)1个
人中性粒细胞分离液 1.085200mL 0.5mL DNA 离心超滤管 (30-50 KD)1个
人粒细胞分离液 1.113200mL 0.5mL DNA 离心超滤管 (150-250 KD)1个
小鼠肿瘤细胞分离液 1.070200mL
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白色葡萄球菌 异型酒香酵母
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惰性解油螺旋菌 苏云金芽孢杆菌猝倒亚种
沙保罗琼脂平板70mm 玖红穗状霉
烟曲霉 营养琼脂(NAP)[肉汤琼脂平板][空气平皿]90mm
师岗链霉菌 菲律宾链霉菌
胰蛋白胨大豆琼脂表面培养基(二)60mm洗必泰、季铵盐类消毒剂的消毒过的物表 费氏志贺氏菌(福氏志贺氏菌)
NMY51 酵母感受态细胞10×100μL费用红平红球菌 木素木霉
紫色小单孢菌(绛红小单孢菌) 山梨醇发酵管5ml 30 支/盒
多粘芽孢杆菌 芽孢杆菌
山梨醇发酵管5ml 30 支/盒 胰蛋白胨大豆琼脂表面培养基(四)60mm表面活性剂的各种复方消毒剂消毒过的物表
芽孢杆菌 娄地青霉
操作步骤:
1. NMY51 酵母感受态细胞10×100μL费用匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
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文献和实验CD51 分子 CD51 常用单克隆抗体或代号: 13C2,23C6,NK1- M7;(VNRa 链,integrin a V) 主要表达细胞: Pt,En,Meg [Pt] 分子质量(kDa)和结构: gp150,与CD61组成二聚体 功 能: 粘附VN、FN和vWF CD51 Aka vitronectin receptor-alpha chain; beta chain
Biochemical Studies on Human Rad51-Mediated Homologous Recombination
Rad51-mediated pairing between homologous DNA sequences during homologous recombination (HR) plays pivotal roles in DNA double-strand break repair. The multi-step process occurs through cooperation of Rad51 and a number of accessory protein
51 Cr 释放实验 1 .在 96 孔圆底细胞培养板中加入 51 Cr 标记的靶细胞,每孔加 100 μ l 。 2 .向各孔加 100 μ l 效应细胞,效应细胞与靶细胞的比例(效靶比, E : T )根据要求而定,通常为 5 : 1 ~ 20 : 1 。阴性对照孔(自然释放)不加效应细胞只加 100 μ l 完全培养液,阳性对照孔(最大释放)中加 100 μ 1 % NP
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