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- 百奥莱博
- QN0011-DTW
- 北京
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
215
- 英文名：
Phenytoin Sodium
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格：
25g|100g
特别提示：包括苯妥英钠在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：苯妥英钠
英文名称：Phenytoin Sodium
产品货号：QN0011
产品规格：25g|100g
CAS：630-93-3
分子式：C15H11N2NaO2
分子量：274.25
别名：大仑丁;大伦丁;地伦丁;二苯乙内酰脲钠;二苯乙内酰脲;5,5-二苯乙内酰脲钠
除了苯妥英钠试剂,二苯乙内酰脲钠,大仑丁,大伦丁,地伦丁,二苯乙内酰脲,5,5-二苯乙内酰脲钠，我公司还供应以下相关产品：
名称：利奈唑酮
货号：QN0006
规格：1g|5g
CAS：165800-03-3
分子式：C16H20FN3O4
分子量：337.35
别名：雷奈佐利;吗lín恶酮;利奈唑胺;利奈唑烷;雷奈佐利;利奈唑
名称：替米考星
货号：QN0015
规格：1g|5g|25g
CAS：108050-54-0
分子式：C46H80N2O13
分子量：869.13
别名：替米可新
性状：白色或类白色粉末
储存条件：-20℃，避光防潮密闭干燥。
名称：泰乐菌素
货号：QN0016
规格：1g|5g
CAS：1401-69-0
分子式：C46H77NO17
分子量：916.1
别名：太乐菌素;泰乐霉素;泰洛霉素;泰洛星
储存条件：2～8℃
名称：美洛昔康
货号：QN0027
规格：5g
CAS：71125-38-7
分子式：C14H13N3O4S2
分子量：351.4
纯度：99%
储存条件：室温
名称：头孢他啶
货号：QN0052
规格：1g
CAS：72558-82-8
分子式：C22H22N6O7S2
分子量：546.58
储存条件：RT
性状：无色结晶或白色粉末。
别名：头孢噻甲羧肟
名称：头孢唑啉钠
货号：QN0057
规格：5g
CAS：27164-46-1
分子式：C14H13N8NaO4S3
分子量：476.49
储存条件：2～8℃
别名：唑啉头孢菌素钠
名称：萘啶酮酸
货号：QN0085
规格：10g
本品是细菌DNA合成酶和鸟类成骨髓细胞瘤病毒反转录酶的抑制剂。主要对革兰阴性菌有效，对大肠杆菌、痢疾杆菌、伤寒杆菌及变形杆菌等，具抑菌和杀菌作用。
CAS：389-08-2
分子式：C12H12N2O3
分子量：232.24
储存条件：室温干燥保存
纯度：＞98%
性状：白色或类白色结晶性粉末
名称：潮霉素B
货号：QN0095
规格：1g
本品由吸水链霉菌代谢产生的一种氨基糖苷类抗生素，通过干扰70S核糖体易位和诱导对mRNA模板的错读而抑制蛋白合成，从而杀死原核(如细菌)、真核(如酵母菌，真菌)和高等哺乳动物真核细胞。本品是无菌的潮霉素B溶液(100mg/ml)，可直接用培养液稀释使用。
CAS：31282-04-9
分子式：C20H37N3O13
分子量：527.52
储存条件：2～8℃
性状：澄清或轻微浑浊黄色溶液
大肠杆菌( Escherichia coli.)来源的潮霉素抗性基因(hyg或hph)，编码潮霉素B磷酸转移酶，将潮霉素B转化成不具有生物活性的磷酸化产物，从而起到解毒作用。针对这一原理，潮霉素B是一种非常有用的选择性标记，用来筛选和维持培养成功转染潮霉素抗性基因的原核或者真核细胞。另外，由于作用模式的差异，常与G418，Zeocin™ 和Blasticidin S联合使用进行双抗性阳性细胞株的选择。潮霉素B还能用作抗病毒剂，因其选择性渗透进入因病毒感染增强通透性的细胞，且具有抑制翻译的功效。还可混合入动物饲料中起到驱虫功能。
使用方法：
1. 常用筛选浓度
注意：潮霉素B用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定zuì佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素zuì低浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1)第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2)根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
| 终浓度(μg/mL) | 培养基体积(ml) | 5mg/ml潮霉素B加入体积(ml) |
| 50 | 9.9 | 0.1 |
| 100 | 9.8 | 0.2 |
| 250 | 9.5 | 0.5 |
| 500 | 9.0 | 1.0 |
| 750 | 8.5 | 1.5 |
| 1000 | 8.0 | 2.0 |
3)第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4)接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5)按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的zuì低浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1)转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤效果zuì好。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，zuì好将细胞稀释至丰度不超过25%。
2)每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3)筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4)挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5)之后更换正常培养基培养即可。
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