TEV蛋白酶

特别提示：包括TEV蛋白酶在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：TEV蛋白酶
英文名称：TEV Protease
产品货号：MT0083
产品规格：1000U

本品是经过基因工程改造后的重组蛋白酶，它可特异性识别Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Gly七氨基酸序列，并高特异性、高活性剪切(剪切位点在Gln-Gly之间)。TEV蛋白酶经6XHis标签纯化而得(含组胺酸标签)，纯度达99％，剪切反应完毕后可通过Ni-NTA Resin(货号：MT0081)去除。TEV酶在4℃-30℃温度、pH范围（6.0～8.5）反应条件下均具有活性(见下表)。本品主要用于融合蛋白标签剪切去除。
 

不同温度下剪切活性(%)
	4℃	16℃	21℃	30℃
0.5 h	34	58	56	70
1 h	58	80	78	90
2 h	71	99	99	99
3 h	84	99	99	99

产品组成：

组分	规格
TEV Protease(10U/μl)	100μl
20×TEV Buffer	1ml
0.1M DTT	100μl

保存条件：长期储存-70℃，可储存2年，-20℃可储存6个月。

单位定义：在1×TEV Buffer，30℃反应1h，剪切＞85％的3μg底物所需要的酶量定义为一个活性单位。

应用实例：

重组表达的SUMO-TEV-Y融合蛋白经rTEV酶切后去除SUMO融合标签。
M：Protein Marker；
泳道1：纯化后的SUMO-TEV-Y蛋白；
泳道2：1μl TEV蛋白酶酶切1h产物；
泳道3：1μl TEV蛋白酶酶切3h产物。

操作方法：

1．在EP管中配制如下反应体系：
  融合蛋白————————20μg
  20×TEV Buffer—————7.5μl
  0.1M DTT————————1.5μl
  TEV 蛋白酶———————1～3μl
  ddH2O—————————-Up to 150μl
2．30℃孵育，在1、2、4、6小时分别吸出30μl上述反应液，置于单独的EP管中。
3．向上述EP管中加入30μl 2×SDS Loading Buffer，置于-20℃。
4．样品全部反应完毕后，样品煮沸5分钟，取40μl进行SDS-PAGE分析。
5．如融合蛋白要求低温处理，可将反应液置于4℃，请延长反应时间，并增加TEV蛋白酶用量。

除了TEV蛋白酶,，我公司还供应以下相关产品：



名称：Dicer(RNase III)
货号：BTN130676
规格：200U
Dicer(RNase III)能在含有锰离子的反应缓冲液中，将较长双链RNA切割成一组由18-25bp组成的小片段干扰RNA(siRNA)，更适合用于哺乳动物细胞的RNA干扰实验。用1.5个单位(1μl)的Dicer(RNase III)能够将1μg的dsRNA完全切割成siRNA，其反应图如下：


产品特点：
1．为RNA干扰研究提供siRNA；
2．基因沉默；
3．靶标确认；
4．去除dsRNA；
5．无核酸内切酶和外切酶污染。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期两年。

活性定义：1单位指50μl的反应体系中，37℃条件下，20分钟将1μg dsRNA切割成siRNA所需要的酶量。

名称：BglII限制性内切酶
货号：SV0132
规格：10KU|10KU|2KU|1KU
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 10%
BalbBuffer 2.1: 10%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: <10%
特性:
重组酶、省时酶。
反应条件:
BalbBuffer 3.1，37℃。
浓度:
10,000和50,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

名称：DpnII限制性内切酶
货号：SV0306
规格：5KU|5KU|1KU|1KU
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 25%
BalbBuffer 2.1: 25%
BalbBuffer 3.1: 100*%
CutSmart Buffer: 25%
特性:
重组酶、省时酶。
反应条件:
Dpnll 反应缓冲液，37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
10,000和50,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam甲基化敏感。
注意事项:
该酶切割产生 5´ GATC的突出端，能有效地与 BamHl、Bcll、Bglll、Mbol、Sau3Al和BstYl 切割产生的 DNA 片段连接。
*在该缓冲液中可能出现星号活性。

名称：NsiI-HF限制性内切酶
货号：SV0572
规格：5KU|1KU|500U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: <10%
BalbBuffer 2.1: 20%
BalbBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度:
20,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

名称：SphI-HF限制性内切酶
货号：SV0723
规格：2500U|2500U|500U|250U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 50%
BalbBuffer 2.1: 25%
BalbBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
20,000和100,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
注意事项:
该酶切割产生一个 3´ CATG的突出端，能有效地和 Nlalll 切割产生的 DNA 片段连接。

名称：T4 RNA 连接酶 1（ssRNA 连接酶）
货号：SV1389
规格：5KU|1KU
特性:
连接单链 RNA 和 DNA
用 5´ -[32P] pCp 进行 RNA 3´ 末端标记
RNA 和 DNA 分子内及分子间的连接
合成单链寡脱氧核苷酸
蛋白质中掺入非天然氨基酸
概述:
催化 3´ →5´ 磷酸二酯键的形成，使核苷酸的 5´ -磷酸末端和 3´ -羟基末端连接，伴随着 ATP 水解为 AMP 和 PPi。作用底物包括单链 RNA、DNA 及二核苷焦磷酸。
来源:
携带 T4 RNA 连接酶 1 基因的 E. coli 菌株。
反应条件:
1X T4 RNA 连接酶缓冲液
[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，10 mM MgCl2，1 mM DTT]，加入 1 mM ATP，37℃ 温育。
热失活:65℃ 15 分钟或煮沸 2 分钟。
使用注意事项:
pCp 的连接需要加入终浓度为10%（v/v）的 DMSO。
随酶提供试剂:
10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
10 mM ATP（M0204）或 100 mM ATP（M0437）50% PEG 8000
质保声明:
无单链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase 和磷酸酶污染。
单位定义:
1 单位指 37℃ 条件下，30 分钟内将 1 nmol 的 5´ -[32P] rA16 转化成磷酸盐不溶物所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们咨询。
浓度:
10,000 或 30,000 units/ml。

名称：胰蛋白酶-ultra，质谱级
货号：SV1565
规格：100μg
特性:
蛋白酶解产物可用于质谱分析蛋白质组
可用于蛋白和多肽的鉴定
TPCK 处理去除胰凝乳蛋白酶活性
无蛋白酶污染
概述:
胰蛋白酶-ultra，质谱级是一种丝氨酸肽链内切酶类，可特异性地切割赖氨酸和精氨酸残基的C 端肽键。经甲*磺酰苯丙氨酰氯甲酮（TPCK）处理的胰蛋白酶-ultra，质谱级灭活了残留的胰凝乳蛋白酶活性。赖氨酸残基的 ε-氨基基团进行乙酰化修饰，以防止酶自裂解。经 TPCK 处理过的胰胰蛋白酶-ultra，质谱级，切割赖氨酸-脯氨酸和精氨酸-脯氨酸之间的肽键速率比切割其它氨基酸残基要慢得多。
来源:
来自牛（Bos taurus）胰脏。
反应条件:
1X 胰蛋白酶-ultra 反应缓冲液[50 mM Tris-HCl，20 mM CaCl2（pH 8.0 @ 25 ℃）]，37℃ 温育。
随酶提供的试剂:
2X 修饰胰蛋白酶-ultra 反应缓冲液。
比活力:
~2.1 μmol/min/mg。
分子量:
23,675 daltons。
重溶:
用 20-200 μl 的高纯水溶解。快速自裂解效率随酶浓度:不同而异。
注意事项:
以液态形式于 -20℃ 可贮存 1 周，但液态形式保存会降低活性。欲达到zuì佳效果，请使用新鲜重溶的蛋白酶。