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- 2025年07月16日
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● 操作简单，短时间即可标记大量个体
● 可根据要求单独定制每个标签编号，方便实验设计
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-tag标记 9cm体长牙鲆
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文献和实验最近尝试使用CFSE检测人外周血CD4+T细胞体外扩增情况，操作流程如下：1、分离CD4+T：Ficoll分离人外周血PBMC，CD14磁珠（Miltenyi）阴选其中CD14-细胞，CD4磁珠（Miltenyi）阳选CD4+T细胞，流式检测CD4+T纯度>98%（两步法按照Miltenyi CD4磁珠protocol）；2、CFSE标记：CFSE试剂购自Invitrogen（C34554）。标记步骤按照试剂protocol，即：定容至1x106个细胞/ml→直接向细胞悬液中加入5mM
用 T4 标记的 5’ 末端 1． 无菌的 1.5ml 为了离心管置冰浴上顺序混合下列组分： 50 pmol 合成的寡核苷酸 2.5 μ l 10 ×反应缓冲液 10 μ l γ -[32 P]ATP （ 33pmol ） 1.5 μ l T4 多核苷酸激酶（ 15U ） 灭菌双蒸水加至 25 μ l 2． 37 ℃温育 30min 。 3． 当反应物正温育时，以 2000 × g 离心 2min 制备
氯胺T法标记效率高、重复性好、试剂便宜易得，是目前使用最多的碘标记方法。 1 ．原理氯氨 —T （ Chloramine--T ）是一种温和的氧化剂，在水溶液中产生次氯酸，可使碘阴离子氧化 成碘分子。这活性碘可取代肽链上酪氨酸苯环上羟基位的一个或两个氢，使之成为含有放射性碘化酪氨酸的多肽链。 2．方法以 125 I—AVP的制备为例
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