- ¥1960
- 江蓝纯
- jlc-A6192
- 进口/国产
- 2025年07月10日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
1000
- 适应物种：
人/动物/植物
- 应用：
仅供科研研究使用
- 检测方法：
ELISA 法
- 供应商：
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 规格：
96T/48T
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文献和实验乙酸和丙酮使蛋白质变性并沉淀的提取方法。本方法起源于 Wu 和 Wang [ 2] 最初关于三氯乙酸沉淀蛋白质能高效抑制蛋白酶活性的报道。提取出来的蛋白质最后溶解在尿素-碳酸钾-SDS (UKS )[ 3] 溶液中。用本方法提取的蛋白质样品在电泳中具有很好的重复性，同时对于高分子质量和髙等电点的蛋白质也有很好的分辨率，因而被广泛使用，且命名为三氯乙酸/丙酮法[ 4, 5 ] 。 UKS 样品缓冲液适合用于最初的自制管胶进行的等电聚焦电泳。这种自制管胶进行等电聚焦时，pH 梯度是在施加电压后由两性
，否则基因组 DNA 裂解成小片段，有可能对质粒造成污染。SDS 作用是结合蛋白质，为下一步做准备。5. 加 150μl 用冰预冷的溶液 Ⅲ，盖紧管口，将管倒置后温和地振荡 10 秒钟，使溶液 Ⅲ 在粘稠的细菌裂解物中分散均匀，之后将管置于冰上 3-5 分钟。溶液 Ⅲ5 mol/L 乙酸钾 60 ml冰乙酸 11.5 ml水 28.5 mlTips：这一步主要作用是中和，避免质粒长时间在碱性条件下造成损伤，此时质粒溶解在中和液上清中。SDS 的钾盐是不溶于水的，也直接导致与之结合的蛋白质沉淀，由于基因
2. 实验仪器：酶标比色计、96 孔板、移液枪、离心管、离心管盒3. 所需试剂及试剂盒：碳酸盐包被缓冲液、抗体球蛋白、吐温-20、柠檬酸、硫酸二、实验操作1. 包被抗体：用包被缓冲液稀释特异性抗体球蛋白至最适浓度（1～10 μg /ml），每凹孔加 0.3 ml，4℃ 过夜，或 37℃ 水浴 3 小时，贮存冰箱。2. 洗涤：移去包被液，凹孔用洗涤缓冲液（含 0.05% 吐温-20）洗 3 次，每次 5 分钟。3. 每凹孔加入 0.2 ml 用稀释缓冲液稀释的含抗原的被检标本，37
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