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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
1000
- 适应物种:
人/动物/植物
- 应用:
仅供科研研究使用
- 检测方法:
ELISA 法
- 供应商:
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥1580.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥1980.0 |
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文献和实验体外哺乳类细胞基因突变(HGPRT)试验原理及注意事项 In vitro Mammalian Cell Gene Mutation Test 【试验原理】 体外哺乳动物细胞基因突变试验是利用培养的哺乳动物细胞作指示生物的体外遗传毒理学试验,可用于检测有化学物质诱导的基因突变,适用的细胞系包括小鼠淋巴瘤细胞(L5178Y),中国仓鼠肺细胞(V79),中国仓鼠卵巢细胞(CHO),人类淋巴母细胞(TK6)等。这些细胞系,常用的遗传学终点是检测胸苷激酶(TK)图标,次黄嘌呤鸟嘌呤转磷酸核糖
,这是本实验成败的关键。所有的组织中均存在RNA酶,人的皮肤、手指、 试剂 、容器等均可能被污染,因此全部实验过程中均需戴手套操作并经常更换(使用一次性手套)。所用的玻璃器皿需置于干燥烘箱中200℃烘烤2小时以上。凡是不能用高温烘烤的材料如塑料容器等皆可用0.1%的焦碳酸二乙酯(DEPC)水溶液处理,再用 蒸馏 水冲净。DEPC是RNA酶的化学修饰剂,它和RNA酶的活性基团组氨酸的咪唑环反应而抑制酶活性。DEPC与氨水溶液混合会产生致癌物,因而使用时需小心。试验所用
专用。 二、常用的RNA酶抑制剂 1. 焦磷酸二乙酯(DEPC):是一种强烈但不彻底的RNA酶抑制剂。它通过和RNA酶的活性基团组氨酸的咪唑环结合使蛋白质变性,从而抑制酶的活性。 2. 异硫氰酸胍:目前被认为是最有效的RNA酶抑制剂,它在裂解组织的同时也使RNA酶失活。它既可破坏细胞结构使核酸从核蛋白中解离出来,又对RNA酶有强烈的变性作用。 3. 氧钒核糖核苷复合物:由氧化钒离子和核苷形成的复合物,它和RNA酶结合形成过渡态类物质,几乎能完全抑制RNA酶的活性。 4. RNA
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