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6个月
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上海机纯实业有限公司
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常温,避光
- 规格:
200ml/KIT
品牌: gelatins
数量: 大量
保质期: 6个月
保存条件: 常温,避光
小鼠脾脏淋巴细胞分离液试剂盒产品为本公司畅销的产品之一
中文名:小鼠脾脏淋巴细胞分离液试剂盒
产品规格:200ml/KIT
用途:本产品仅供实验室药品检测用,不作其他用途。
购买我公司的小鼠细胞分离液我们将免费为您提供全程技术指导,解决您的后顾之忧。
分离原理:
除去血液中的纤维蛋白或肝素处理血液以1:1的比例用生理盐水或平衡盐溶液稀释,在分离溶液中分层,低速离心30分钟。通过离心,迁移能力不同终形成不同的细胞层。
大部分的红细胞和粒细胞通过梯度迁移形成颗粒状。由于其密度不同,淋巴细胞和其他单个核细胞(单核细胞和血小板)分布在在血浆和LSM两层中间。淋巴细胞可以通过回抽分层回收,在进一步去除血小板,LSM和血浆。
用途:
用于体外分离人外周淋巴血细胞,也可以从其他来源中分离单核细胞,包括脐带血细胞和骨髓细胞。
分离方法:
分离混合血液白细胞早期的方法,总是伴随红细胞聚集,只轻微影响白细胞。通过离心,红细胞密度增加聚集,同时可以从离心管上部收集白细胞。
通过使用甲泛影钠溶液离心快速分离方法。稀释的血液在甲泛影钠溶液中分层,低速短时离心。红细胞和沉降到管底的粒细胞,和单个核细胞(淋巴细胞)和血小板可以从两个分层之间收集。
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文献和实验细胞筛网置于培养皿中,取小鼠脾脏放置于筛网中,加入 5ml 达优小鼠淋巴细胞分离液,对脾脏轻轻进行研磨(注:此步操作要快,避免分离液蒸发); 2. 把悬有脾脏细胞的的分离液立即转移至 15ml 离心管中,随后在分离液上层轻轻覆盖 500-1000μl 的 RPMI1640 培养基(保持分离液与培养基分界明显); 3. 室温,水平转子 800g 离心 30 分钟,设置离心机为缓升缓降; 4. 离心结束后吸出淋巴细胞层(白膜层),加入 10ml RPMI1640 洗涤一遍细胞,250g 离心 10
度的功能细胞。二、人外周血中 CD4 T 细胞分选实例1.产品信息: MojoSort™ Human CD4 T Cell Isolation Kit(BioLegend, Cat#480009),阴性分选试剂盒2.检测仪器型号:BD LSRⅡ3.样本:正常人外周血4.分选前后检测相关产品:PE-CD4(Biolegend, Cat# 317410)5.实验过程(1)采血之后采用达优™ 人淋巴细胞分离液分离人外周血单个核细胞。分离之后能见到明显的白膜层。(达优,Cat#DKW-KLSH-0100
液:用 DMSO 配置终浓度为 5 mM 的 CFSE 溶液(1000×)RPMI 1640 完全培养基:RPMI 1640 培养基 + 10% 血清 + 1% 双抗☟☟☟— 实验正式开始 —1. 脾淋巴细胞的制备无菌操作取出小鼠脾脏,研磨成单细胞悬液,用红细胞裂解液或者小鼠淋巴细胞分离液去除红细胞,将细胞过 40 μm 细胞滤网后,进行细胞计数。样本清洗液洗涤(可用 PBS 或者不含血清双抗的培养基代替),1 500 rpm 离心 5 min,用 PBS 重悬,调整细胞浓度为 107/ml。2. CFSE
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