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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 英文名:
Fluorescein-12-dUTP 溶液,1mM
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
25μL
1)Fluorescein-12-dUTP 溶液,1mM25μL说明书客户提供材料
2)提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供:
新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供:基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证:高纯度RNA/DNA、完整货期:3-5个工作日
以下是Fluorescein-12-dUTP 溶液,1mM25μL说明书的详细介绍点击了解更多探针标记及检测产品:

储存事项:
A. Fluorescein-12-dUTP 溶液,1mM25μL说明书在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打,颠倒混匀,充分溶解RNase A和DNase I后,按照每次使用量分装-20℃冻存,有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项:
1. Fluorescein-12-dUTP 溶液,1mM25μL说明书组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
实验步骤:
(1) Fluorescein-12-dUTP 溶液,1mM25μL说明书实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
腺嘌呤核苷(腺苷)(标准品)58-61-7质量规格:HPLC>98%,标准品
盐酸阿地芬宁50-42-0质量规格:含量> 99%
盐酸阿地芬宁(标准品)50-42-0质量规格:HPLC>98%,标准品
醋酸阿拉瑞林/丙氨瑞林 79561-22-1质量规格:>98%,BR
阿仑磷酸钠121268-17-5质量规格:>99%,USP
左旋肉碱盐酸盐(>98%,BR)L-Carnitine hydrochloride质量规格:>98%,BR
左旋肉碱酒石酸盐(>99%,BR)L-Carnitine L-tartrate质量规格:>99%,BR
碘化铅(>98%,BR)Lead (II) iodide质量规格:>98%,BR
硬脂酸铅Lead (II) stearate质量规格:BR
硫酸铅(>99%,BC)Lead (II) sulfate质量规格:>99%,BC
左乙拉西坦质量规格:>99%,BR,USPLevetiracetam
左乙拉西坦(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Levetiracetam
盐酸林可霉素质量规格:>850mcg/mg,BRLincomycin HCl
盐酸林可霉素(标准品)质量规格:HPLC含量测定Lincomycin HCl
三碘代甲状腺素钠盐质量规格:>97.0%,BRLiothyronine sodium
pH7.0-蛋白胨缓冲液200ml 烟曲霉
登佐链霉菌 贝酵母
化脓性链球菌 嗜热链球菌
异常汉逊酵母 产黄青霉
近平滑假丝酵母 改良马丁琼脂培养基90mm
产氨短杆菌 奇异变形杆菌
印第安那亚种Bacillusthuringiensissubsp.indiana 鲍氏志贺菌CMCC51522冻干粉
蛹虫草(北冬虫夏草、北虫草) 热带假丝酵母
醋酸醋杆菌 海滨芽孢杆菌
单增李斯特菌 蔗糖发酵管5ml 30 支/盒
Fluorescein-12-dUTP 溶液,1mM25μL说明书淡天蓝色链霉菌 胰蛋白胨大豆琼脂表面培养基(三)60mm醛类消毒剂消毒过的物表
短密青霉 普通变形杆菌
玉蜀黍长蠕孢 乳酸乳球菌乳亚种
苏云金芽胞杆菌苏云金变种Bacillusthuringeinsissubsp.thuringeinsis 粗糙链孢霉
大肠埃希菌ATCC8099冻干粉 美味侧耳、紫孢侧耳
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文献和实验Random Prime Labeling of DNA Probes with Fluorescein-11-dUTP
The selection of an appropriate labeling reagent for a particular experiment, for the most part, depends on the sensitivity and resolution required. For maximum sensitivity in filter hybridizations radioactive labels, such as phosphorous 32
3′-End Labeling of Oligonucleotides with Fluorescein-11-dUTP and Enhanced Chemiluminescent Detection
In this reaction, the enzyme terminal transferase is used to introduce a short tail of fluorescein nucleotides to the 3′-end of an oligonucleotide (1 ) followed by horseradish peroxidase-catalyzed enhanced chemiluminescent detection
;4. 用Proteinase K工作液处理组织15-30 min 在21–37°C(温度、时间、浓度均需摸索)或者加细胞通透液8min;5. PBS漂洗2次;6. 制备TUNEL反应混合液,处理组用50μl TdT+450μl 荧光素标记的dUTP液混匀;而阴性对照组仅加50μl 荧光素标记的dUTP液,阳性对照组先加入100μl DNase 1,反应在15~25℃×10min,后面步骤同处理组。7. 玻片干后,加50μl TUNEL反应混合液(阴性对照组仅加50μl 荧光素标记的dUTP液)于标本上,加盖玻片或封口
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