- ￥100 - 2000
- xuanya
- 美国/中国
- XY-TE-0920
- 2025年11月22日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
两年
- 英文名：
Agrobacterium GV3101 Chemical Competent Cell
- 库存：
900
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
本产品为 GV3101 农杆菌化学感受态细胞，其具有利福平和庆大霉素抗性， 适用于拟南芥、烟草、玉米、土豆等植物的转基因操作，经 pCAMBIA2301 质 粒检测转化效率高达 104cfu/μg。
基因型： C58 (rif R ) Ti pMP90 (pTiC58DT-DNA) ( gentR/strepR ) Nopaline
GV3101农杆菌感受态细胞运输及保存：
干冰运输，-80℃保存，有效期一年。
自备试剂：质粒 DNA、液氮等
GV3101农杆菌感受态细胞使用方法
转化前准备
1. 冰水浴和 37℃水浴。
2. 液氮或干冰/乙醇混合物。
3. 将抗性平板在 28℃培养箱中平衡至少 15 分钟。
GV3101农杆菌感受态细胞转化方法
1. 取-80℃保存的农杆菌感受态细胞于冰水浴中融化。
2. 无菌条件下，向刚刚融化的感受态细胞悬液中加入需要转化的质粒，每 100 μL 感受态细胞加 1ug 质粒 DNA，轻柔混匀。冰水浴中静置 10 分钟。
3. 将离心管置于液氮中速冻 5 分钟（注：也可以用干冰和无水乙醇混合物替代 液氮）。
4. 迅速将离心管置于 37℃水浴静置中 5 分钟，不要晃动水面。然后快速转至 冰水浴中静置 5 分钟。
5. 加入 800 μL 无抗生素的 2×YT 或 LB 液体培养基，28-30℃振荡培养 2~3 小时。使菌体复苏，表达抗性。
6. 5000 rpm 离心 1 分钟收菌，保留 100 μL 左右上清，轻轻吹打重悬菌体， 均匀涂布到含有相应抗生素的 LB 固体培养基平板上，待平板中的液体完全 吸收后，倒置平板，28-30℃培养 48-72 小时。
注：当平板只含有 50 ug/mL kan 时，28℃培养 48 小时即可；平板中同 时加入 50 ug/mL kan，20 ug/mL rif 时，需 28℃培养 60h；如果使用 的平板含有 50 ug/mL rif 则需要 28℃培养 72-90 小时。
GV3101农杆菌感受态细胞注意事项
1. 加入质粒时体积不应大于感受态体积的 1/10 ；质粒不纯或存在乙醇等有 机物污染，转化效率急剧下降；质粒增大一倍，转化效率下降一个数量级。
2. 混入质粒时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
4. 利福平浓度不应高于 25 ug/uL，过高的利福平浓度不利于农杆菌生长， 会降低其生长速度和转化效率。本公司感受态计算转化效率时所用平板只含有 50 ug/mL kan，若所用平板含有 20 ug/mL rif 则转化效率降低到 1/2。
5. 培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌；根据所用菌株抗 性加入链霉素或庆大霉素可防止 Ti 质粒丢失，但链霉素不利于农杆菌的转基因操作，所以一般培养农杆菌时不考虑链霉素或庆大霉素，Ti 质粒丢失 的概率极低（可以忽略）。
6. 相关抗生素配方：
GV3101农杆菌感受态细胞相关产品：
| 一站式磁珠法动物 mRNAout |
| 一站式全血 mRNAout |
| 一站式磁珠法全血 mRNA 提取试剂盒 |
| 一站式植物 mRNAout |
| 一站式磁珠法植物 mRNAout |
| 一站式真菌 mRNAout |
| 一站式磁珠法真菌 mRNA 提取试剂盒 |
| mRNA 提取试剂盒 |
| 磁珠法 mRNA 提取试剂盒 |
| Oligo(dT) 纤维素 |
| Oligo(dT) 再生溶液 |
| 生物素标记的 Oligo(dT) |
| GV3101农杆菌感受态细胞链霉亲和素磁珠 |
| RNase清除及抑制 |
| 固相 RNase 清除剂 |
| 固相 RNase 清除剂 |
| 气相 RNase 清除剂 |
| 液相 RNase 清除剂 |
| 氧钒核糖核苷复合物 (RVC),0.2M |
| RNA 长效保存液 |
| RNase 抑制剂 ( 人源 ) |
| RNase 抑制剂 ( 人源 ) |
| RNase 抑制剂 ( 小鼠源 ) |
| RNase 抑制剂 ( 猪源 ) |
| RNA样品污染清除 |
| 非酶 DNA 清除剂 |
| 非酶 DNA 清除剂 -2 |
| GV3101农杆菌感受态细胞柱式 DNA 清除剂 |
| 大提柱式 DNA 清除剂 |
| 无 RNase 的 DNase 溶液 ,1U/μL |
| 膜结合 DNA 清除试剂盒 |
| 非酶多糖清除剂 (RNA 专用 ) |
| RNA提取相关产品 |
| TRIzol 伴侣 |
| 重蒸酚 |
| 水饱和酚 |
| Tris 饱和酚 |
| GV3101农杆菌感受态细胞酸酚 |
| 氯仿 - 混合液 |
| 酚 - 氯仿 - 混合液 (RNA 提取 ) |
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验相关专题 DNA连接与转化 农杆菌感受态细胞的制备 1.挑取少许农杆菌LBA4404，接种于5ml LB液体培养基 (含50mg/L STR)中，28℃、200r/mim培养过夜。 2.取2ml培养物于LB液体培养基 (含50mg/L STR) 中继续培养，直至OD800 为0.5左右。 3.将培养物置冰浴中30min，4℃、5000r/min、离心5min，弃去上清液。 4.用10ml冷
一．农杆菌感受态细胞的制备 （同大肠杆菌质粒DNA的提取），然后将其转化大肠杆菌，再提取大肠杆菌的质粒DNA进行酶切鉴定。取-70℃保存的EHA105于含有50μg/ml链霉素平板划线，28℃培养2天。挑单菌落接种于5ml YM（0.5g/L KH2 PO4 ,10 g/L Mannitol,2 g/L L-Glutamine,0.2 g/L NaCL,0.2 g/L MgSO4 ,0.3 g/L Yeast extract,PH7.0）液体培养基中，220rpm，28℃振荡培养18 hr
Agrobacterium growth and transformation (农杆菌培养及转化)
Growth and storage of Agrobacterium tumefaciens(农杆菌培养及转化) Strain GV3101: resistant to gentamycin and rifampicin so add 25-50 ug/ml Gentamycin, 10 ug/ ml rifampicin on plates or in liquid media for selection. GV3101
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
