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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
两年
- 库存:
900
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
本产品是一管式反转录预混 Mix,内含反转录第一链合成所需的所有试剂 (MMLV、Random primers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反应 Buffer 等), 用户只需加入模板 RNA 和 RNase-Free 水即可进行反应。本产品特点如下:
1. cDNA 的合成更加方便,用户只需准备模板和水即可进行反应。
2. 快捷,操作步骤已经最大限度地简化,能减少污染,降低实验误差。
3. 效率高,特殊优化的 oligo dT 和 N6 随机引物配比,反转录效率高。
4. 速度快,只需 42℃,20 分钟即可完成 cDNA 第一链的合成。
5. 能够用于 GC 含量高,二级结构复杂的 RNA 模板,合成 cDNA 片段长度可达 12 kb。
6. 兼容性好,合成的 cDNA 可直接用于荧光定量 PCR 反应,灵敏度高、稳定性好。

链霉菌PCR Mix 6运输及保存:
低温运输,-20℃保存, 有效期一年。
自备试剂:RNA 模板。
链霉菌PCR Mix 6使用方法
1. 解冻后颠倒轻弹混匀各组分,以 20 uL 体系为例,按下表加入(2×RT Master Mix 很粘稠,取用前请短暂离心,并避免吸头外壁沾附损失):

注意:对于二级结构很复杂的 RNA 模板,推荐使用变性步骤,即在操作步骤之 前,将模板 RNA 在 65℃孵育 5 分钟后迅速转移到冰上,再进行下一步操作。
2. 轻轻混匀,42℃孵育 20 分钟进行反转录反应。
注意:对亍二级结构复杂或者 GC 含量高的模板,可以提高温度至 50℃,以增 强反转录效率。
3. 85℃加热 5 秒钟灭活反转录酶置冰上备用(更长时间保存请置于-20℃)。
链霉菌PCR Mix 6注意事项
1. 实验过程中请注意避免RNase污染,防止RNA降解或实验中的交叉污染。
2. 使用之前请完全溶解并充分混匀,以防因盐离子浓度丌均影响实验结果。
3. 使用后应尽快放回-20℃,避免反复冻融。
4. RNA模板的完整性对cDNA合成效率起着决定性作用,因此请选择可靠的RNA提 取/纯化方法。
5. 如果扩增片段较长或者RNA结构复杂,为了加强转录效果,可以将RNA单独置于 65-70℃加热 5-10分钟后再加入体系。
6. 操作人员请带口罩和一次性手套,并经常更换手套。
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文献和实验(room temperature)water with gentle stirring. (Do not heat water)3、Rinse out inside of package to remove all traces of powder.4、 Add 3.7g of NaHCO3 per liter of medium.5、Dilute to a desired volume with water. Stir until dissolved. (Do not over-mix
5. Dilute to a desired volume with water. Stir until dissolved. (Do not over-mix) 6. Adjust pH of medium to 0.2-0.3 below desired final working pH* use of IN NaOH or IN HCl is recommended. (Add slowly with stirring) After pH has been adjusted
out inside of package to remove all traces of powder. 4. Add 3.7g of NaHCO3 per liter of medium. 5. Dilute to a desired volume with water. Stir until dissolved. (Do not over-mix) 6. Adjust pH of medium to 0.2-0.3 below desired final working pH* use
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